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entiaopi

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何进行双酶切胶回收,质粒中的标记基因是哪个?

我现在做的是把一个基因转移到,t载体上面,再转到p载体上。本人没有做过双酶切,不知道怎么如何将提取的含有目的基因的t载体酶切,然后装到p载体上面。
然后二者连接后需要纯化还是可以直接导入感受态细胞
最后问下这个载体的标记基因是哪个?可以用蓝白斑筛选吗?

如何进行双酶切胶回收,质粒中的标记基因是哪个?


@wizardfan 发自小木虫Android客户端
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entiaopi

新虫 (初入文坛)

可能语无伦次了,因为之前没做过这类实验,不好下手。搞失败会被导师批评

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2楼2017-11-06 23:07:37
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匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
3楼2017-11-06 23:11:12
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entiaopi

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kentyu at 2017-11-06 23:11:12
kan抗性呀,你看看质粒的说明书,商家一般都会有相应的介绍

请问一下,那如何知道转化进入的不是空质粒呢?

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4楼2017-11-06 23:25:57
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xtcao668

至尊木虫 (著名写手)

卡纳抗性原核筛选,色氨酸在酵母中筛选

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生活的理想就是理想的生活
5楼2017-11-06 23:46:49
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buthey

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by entiaopi at 2017-11-06 23:25:57
请问一下,那如何知道转化进入的不是空质粒呢?
...

菌液PCR

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6楼2017-11-08 13:16:52
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