| 查看: 7540 | 回复: 17 | ||
[求助]
求助！关于DPPC脂质体的粒径问题 已有2人参与
|
||
|
最近用DPPC制备脂质体，用的是薄膜水化法，PBS水化，然后探头100w功率超声10分钟，超声完后变得澄清，然后在55度的烘箱里（除了烘箱没有别的升温设备了，实验室里的水浴锅太小了）过100nm的聚碳酸酯膜21次，过的时候还挺好过的，制备好后用DLS的方法测粒径，是用马尔文粒径仪，结果测出来最好一次粒径也有240nm左右，昨天测的更是离谱，探头超声变得澄清后，测粒径居然有800nm，还出现了2个分布峰，如图所示，DPPC我看挺多人做的，但是我按照文献里做怎么都做不出来100nm的效果，已经摸索了一个月的条件了。以前还用SPC做过脂质体，SPC相变温度低，很容易就得到100多nm的结果。 DPPC是不是因为相变温度太高，所以过膜后温度回到常温分子就从液晶态转变为凝胶态了，于是又聚集起来了？如何控制DPPC的粒径呢？加入胆固醇会不会好一点？ 求助啊，真要被这个逼疯了   捕获.PNG |
回复此楼» 猜你喜欢
反应产物总提不上量？聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
已经有0人回复
-
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
生物物理、生物化学与分子生物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有210人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
已经有5人回复
-
【交流】蛋白标签切除踩坑不断？聊聊 TEV 蛋白酶实操体会
已经有0人回复
-
【交流】SUMO 融合蛋白切标签踩坑？聊聊 SUMO 蛋白酶实操体会
已经有1人回复
-
这些国际期刊正在招募青年编委
已经有22人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
空心大萝卜
木虫 (小有名气)
闲散人员
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2173.5
- 散金: 222
- 帖子: 286
- 在线: 667.5小时
- 虫号: 1823867
- 注册: 2012-05-18
- 性别: GG
- 专业: 分析化学
6楼2017-11-14 22:10:42
8楼2017-11-15 17:00:07
|
谢谢你的解答，我最后用dppc实在做不出来，于是换了相变温度低的popc初始粒径还挺小的，但又有一个问题就是用马尔文测的时候重复四次，主要看peak1.的值，测的结果可能差的挺大，比如四次结果是162 172 145 165这样，是不是因为我的脂质体不稳定啊？_(:з」∠)_ 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-11-15 17:05:37
空心大萝卜
木虫 (小有名气)
闲散人员
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2173.5
- 散金: 222
- 帖子: 286
- 在线: 667.5小时
- 虫号: 1823867
- 注册: 2012-05-18
- 性别: GG
- 专业: 分析化学
11楼2017-12-14 21:11:04
13楼2017-12-20 14:28:18
|
不好意思现在才看到，这种纯脂质体本来稳定性就不太好，确实很容易沉，我们实验室的制备是水化之后，水浴超声，然后过100nm膜21次，再定容到100毫升，配出来的溶液也不是透明的，除非你用探头一开始就把它超声到透明，那个时候粒径很小了，后面配成溶液就能透明，但是我不建议你把它用探头超声到透明，因为会把脂质体超声超得太碎，粒径分布可能会有双峰，而且探头的金属钛屑还会污染脂质体 发自小木虫Android客户端 |
15楼2018-01-09 11:37:13
|
是用pbs溶，测粒径溶剂选水，溶质选蛋白质，你的pdi值最好要小于0.3，我测电位的时候也没有分布曲线图，我们是只要电位的值就好了，只要求看一个大致的规律，所以对我来说没啥影响 发自小木虫Android客户端 |
16楼2018-01-09 11:42:41
xiaom_uchong
木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 8084.4
- 红花: 11
- 帖子: 2408
- 在线: 126.9小时
- 虫号: 3317375
- 注册: 2014-07-10
- 性别: GG
- 专业: 肿瘤化学药物治疗
2楼2017-11-01 22:16:17
3楼2017-11-01 22:20:19
4楼2017-11-09 15:39:27
5楼2017-11-11 17:01:04
7楼2017-11-15 16:58:46
10楼2017-12-14 10:52:29
投票:
