【答案】应助回帖

» 猜你喜欢

统计一下：硕士毕业答辩后的谢师宴是学生出钱，还是老师出钱？已经有5人回复
博士高校求职安建大vs西科大已经有10人回复
职能部门工作人员态度不好是普遍的吗？怎么让他们态度好一些？已经有3人回复
每到中夜，情难自抑已经有58人回复
实验室太吵闹，无法安静学习，怎么办？已经有12人回复
申请2024或2025年博士研究生已经有12人回复
在大地上我们只过一生---看完我的阿勒泰上头了好几天，完结那天晚上几乎失眠已经有13人回复
双非本科毕业论文，气人已经有12人回复
化学B02口青基代表作都是什么水平的？向大佬求助已经有10人回复
化学口B0109(高分子合成)，拿青年基金一般需要怎样的文章水平？已经有22人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

elisa实验分析已经有6人回复
我做的Elisa，请大家分析一下为什么会出现这样的结果已经有7人回复
间接ELISA的梯度浓度标准品实验结果却无梯度，求大家帮忙分析一下原因，谢谢！已经有4人回复
ELISA结果分析已经有13人回复
双抗体夹心ELISA的梯度浓度标准品实验结果确无梯度变化，真心求大家帮忙分析原因！已经有23人回复
小分子抗原免疫得到抗体的竞争ELISA结果已经有1人回复
ELISA反结果，求分析已经有1人回复
ELISA的结果分析及相关软件已经有11人回复
【求助/交流】ELISA实验显示全阳性结果分析已经有9人回复

1楼2017-10-12 21:05:51

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

BioEPI: 2
应助: 114 (高中生)
金币: 10248
散金: 50
红花: 30
帖子: 1460
在线: 380.8小时
虫号: 1571969
注册: 2012-01-10
性别: GG
专业: 生物技术药物

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

试剂盒的灵敏程度不够，样品的浓度估计不高，样品的成分估计有一定的干扰抑制的作用。你需要找个高灵敏的试剂盒，将样品稀释倍数增加到10倍以上，到时候估计稀释倍数和检测的浓度值能够比较吻合。好的ELISA试剂盒应该能够将定量下限推导500pg一下

赞一下(3人)

8楼2017-10-13 11:49:53

白浅2009

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 634.3
帖子: 139
在线: 75.8小时
虫号: 2108808
注册: 2012-11-05
性别: MM
专业: 药物代谢与药物动力学

引用回帖:

2楼: Originally posted by 残月canyue at 2017-10-12 22:12:35
本身太浓了？稀释的不够？

问了厂家，说是原液的值测得差不多啊，应该不是稀释不够的问题

发自小木虫Android客户端

4楼2017-10-13 08:35:23

卡拉果胶

银虫 (小有名气)

应助: 22 (小学生)
金币: 373.7
散金: 27
红花: 5
帖子: 80
在线: 46小时
虫号: 2757783
注册: 2013-10-27
专业: 免疫学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

个人感觉吸光度这个东西，在均匀的体系里面相对准一点，怕不是样品本身在稀释的时候均一性不够？

6楼2017-10-13 11:15:17

卡拉果胶

银虫 (小有名气)

应助: 22 (小学生)
金币: 373.7
散金: 27
红花: 5
帖子: 80
在线: 46小时
虫号: 2757783
注册: 2013-10-27
专业: 免疫学

引用回帖:

7楼: Originally posted by 白浅2009 at 2017-10-13 11:42:48
稀释完都用枪混匀了几次，这样还不行么
...

我说的均一性，是指是否有悬浊之类的，你稀释的话也混不匀。

个人比较同意八楼的观点。看看你的标准曲线：原液浓度在第二和第三点之间。假定标准曲线上第一个点即12.5为准确可测点，你稀释3倍，理论上约为13左右，在第一个点附近，稀释6倍，在6.5左右，低于第一个点，可以认为测不准。综上，该浓度下，稀释没多大意义。

11楼2017-10-13 15:13:18

白浅2009

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 634.3
帖子: 139
在线: 75.8小时
虫号: 2108808
注册: 2012-11-05
性别: MM
专业: 药物代谢与药物动力学

引用回帖:

11楼: Originally posted by 卡拉果胶 at 2017-10-13 15:13:18
我说的均一性，是指是否有悬浊之类的，你稀释的话也混不匀。

个人比较同意八楼的观点。看看你的标准曲线：原液浓度在第二和第三点之间。假定标准曲线上第一个点即12.5为准确可测点，你稀释3倍，理论上约为13左右 ...

哦哦，样品好像不均一

发自小木虫Android客户端

12楼2017-10-13 16:16:53

soarshining

捐助贵宾 (著名写手)

应助: 142 (高中生)
金币: 988.1
散金: 565
红花: 37
帖子: 1228
在线: 202.4小时
虫号: 3299181
注册: 2014-06-30
专业: 抗肿瘤药物药理

【答案】应助回帖

血浆一般不会影响elisa的测定，我们平时只有做血浆酶学活性分析才会用血清。个人觉得最大的可能是kit本身特异性不佳，可以买个小包装的millipore或者roche、sigma之类试一试。国产的kit，个人觉得仅仅用于临床的kit算是比较靠谱的。

因为你原液的吸光度本身就不高，一般不会是太浓，而是灵敏度太差。虽然是线性的，但你看你的测量结果只在前三个点范围内，那三个点才占多少比例？连1/5都没。还得往下稀释，可能这时候测出来的都是杂蛋白了。

13楼2018-01-03 12:51:53

普通回帖

残月canyue

木虫 (著名写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 4272.8
散金: 6308
红花: 41
帖子: 2529
在线: 318.3小时
虫号: 2821095
注册: 2013-11-23
专业: 药物毒理

本身太浓了？稀释的不够？

发自小木虫Android客户端

平静、平凡、平淡

2楼2017-10-12 22:12:35

chenllili

铜虫 (正式写手)

应助: 9 (幼儿园)
金币: 1862.7
红花: 5
帖子: 317
在线: 141.2小时
虫号: 3399289
注册: 2014-09-04
专业: 生物物理、生物化学与分子

稀释倍数提高，10倍，。。。100倍，200倍，400倍

发自小木虫Android客户端

3楼2017-10-13 00:36:25

白浅2009

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 634.3
帖子: 139
在线: 75.8小时
虫号: 2108808
注册: 2012-11-05
性别: MM
专业: 药物代谢与药物动力学

引用回帖:

3楼: Originally posted by chenllili at 2017-10-13 00:36:25
稀释倍数提高，10倍，。。。100倍，200倍，400倍

正常值也就30ng/ml左右，和我测得原液差不多

发自小木虫Android客户端

5楼2017-10-13 08:36:31

白浅2009

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 634.3
帖子: 139
在线: 75.8小时
虫号: 2108808
注册: 2012-11-05
性别: MM
专业: 药物代谢与药物动力学

引用回帖:

6楼: Originally posted by 卡拉果胶 at 2017-10-13 11:15:17
个人感觉吸光度这个东西，在均匀的体系里面相对准一点，怕不是样品本身在稀释的时候均一性不够？

稀释完都用枪混匀了几次，这样还不行么

发自小木虫Android客户端

7楼2017-10-13 11:42:48

白浅2009

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 634.3
帖子: 139
在线: 75.8小时
虫号: 2108808
注册: 2012-11-05
性别: MM
专业: 药物代谢与药物动力学

引用回帖:

8楼: Originally posted by yyy0305 at 2017-10-13 11:49:53
试剂盒的灵敏程度不够，样品的浓度估计不高，样品的成分估计有一定的干扰抑制的作用。你需要找个高灵敏的试剂盒，将样品稀释倍数增加到10倍以上，到时候估计稀释倍数和检测的浓度值能够比较吻合。好的ELISA试剂盒应 ...

那用血清检测是不是会比血浆好点

发自小木虫Android客户端

9楼2017-10-13 12:48:53

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

BioEPI: 2
应助: 114 (高中生)
金币: 10248
散金: 50
红花: 30
帖子: 1460
在线: 380.8小时
虫号: 1571969
注册: 2012-01-10
性别: GG
专业: 生物技术药物

引用回帖:

9楼: Originally posted by 白浅2009 at 2017-10-13 12:48:53
那用血清检测是不是会比血浆好点
...

如果样品足够的话，你可以尝试一下，我没有这块的直接经验

10楼2017-10-13 12:54:40