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1楼 2017-10-12 21:05:51

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yyy0305

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

试剂盒的灵敏程度不够，样品的浓度估计不高，样品的成分估计有一定的干扰抑制的作用。你需要找个高灵敏的试剂盒，将样品稀释倍数增加到10倍以上，到时候估计稀释倍数和检测的浓度值能够比较吻合。好的ELISA试剂盒应该能够将定量下限推导500pg一下

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8楼2017-10-13 11:49:53

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白浅2009

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2楼: Originally posted by 残月canyue at 2017-10-12 22:12:35
本身太浓了？稀释的不够？

问了厂家，说是原液的值测得差不多啊，应该不是稀释不够的问题

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4楼2017-10-13 08:35:23

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卡拉果胶

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

个人感觉吸光度这个东西，在均匀的体系里面相对准一点，怕不是样品本身在稀释的时候均一性不够？

6楼2017-10-13 11:15:17

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卡拉果胶

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7楼: Originally posted by 白浅2009 at 2017-10-13 11:42:48
稀释完都用枪混匀了几次，这样还不行么
...

我说的均一性，是指是否有悬浊之类的，你稀释的话也混不匀。

个人比较同意八楼的观点。看看你的标准曲线：原液浓度在第二和第三点之间。假定标准曲线上第一个点即12.5为准确可测点，你稀释3倍，理论上约为13左右，在第一个点附近，稀释6倍，在6.5左右，低于第一个点，可以认为测不准。综上，该浓度下，稀释没多大意义。

11楼2017-10-13 15:13:18

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11楼: Originally posted by 卡拉果胶 at 2017-10-13 15:13:18
我说的均一性，是指是否有悬浊之类的，你稀释的话也混不匀。

个人比较同意八楼的观点。看看你的标准曲线：原液浓度在第二和第三点之间。假定标准曲线上第一个点即12.5为准确可测点，你稀释3倍，理论上约为13左右 ...

哦哦，样品好像不均一

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12楼2017-10-13 16:16:53

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soarshining

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【答案】应助回帖

血浆一般不会影响elisa的测定，我们平时只有做血浆酶学活性分析才会用血清。个人觉得最大的可能是kit本身特异性不佳，可以买个小包装的millipore或者roche、sigma之类试一试。国产的kit，个人觉得仅仅用于临床的kit算是比较靠谱的。

因为你原液的吸光度本身就不高，一般不会是太浓，而是灵敏度太差。虽然是线性的，但你看你的测量结果只在前三个点范围内，那三个点才占多少比例？连1/5都没。还得往下稀释，可能这时候测出来的都是杂蛋白了。

13楼2018-01-03 12:51:53

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残月canyue

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本身太浓了？稀释的不够？

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2楼2017-10-12 22:12:35

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chenllili

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稀释倍数提高，10倍，。。。100倍，200倍，400倍

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3楼2017-10-13 00:36:25

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3楼: Originally posted by chenllili at 2017-10-13 00:36:25
稀释倍数提高，10倍，。。。100倍，200倍，400倍

正常值也就30ng/ml左右，和我测得原液差不多

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5楼2017-10-13 08:36:31

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6楼: Originally posted by 卡拉果胶 at 2017-10-13 11:15:17
个人感觉吸光度这个东西，在均匀的体系里面相对准一点，怕不是样品本身在稀释的时候均一性不够？

稀释完都用枪混匀了几次，这样还不行么

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7楼2017-10-13 11:42:48

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白浅2009

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8楼: Originally posted by yyy0305 at 2017-10-13 11:49:53
试剂盒的灵敏程度不够，样品的浓度估计不高，样品的成分估计有一定的干扰抑制的作用。你需要找个高灵敏的试剂盒，将样品稀释倍数增加到10倍以上，到时候估计稀释倍数和检测的浓度值能够比较吻合。好的ELISA试剂盒应 ...

那用血清检测是不是会比血浆好点

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9楼2017-10-13 12:48:53

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9楼: Originally posted by 白浅2009 at 2017-10-13 12:48:53
那用血清检测是不是会比血浆好点
...

如果样品足够的话，你可以尝试一下，我没有这块的直接经验