应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr没有条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 1067  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

新人求帮助

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr没有条带 已有1人参与

我有两条相同来源的基因序列，其功能也相似，但是其中一条扩增不出来，另一条却可以，模板是一样的基因组。扩增不出来的序列是1400bp左右，引物设计的是同源重组的引物，一条tm值是59.4，一条是62.6，我做梯度pcr从50到62都没有条带

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-10-02 17:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mannix Li

新虫 (初入文坛)
既然pcr没有条带，那就要考虑是不是引物问题或者模板问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-10-02 18:08:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mannix Li

新虫 (初入文坛)
模板有可能被降解了，或者是引物本来就和你基因序列结合不上

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-10-02 18:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

新人求帮助

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Mannix Li at 2017-10-02 18:09:43
模板有可能被降解了，或者是引物本来就和你基因序列结合不上

模板肯定没有问题，因为我另外一条基因能p出来，引物是按照基因序列设计的，应该不会有问题的吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-10-02 18:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香蕉芒果99

新虫 (小有名气)
多设计几条引物，筛选出可以用的。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2017-10-02 19:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-10-02 23:25:30
1、用梯度PCR跑，多加一些模板和上下游引物，文献里的退火温度也许并不适合你们实验室的条件，有时候增减0.1度条带差异就很明显。

2、可以降一点退火温度。另外根据你模板序列有没有什么特点，可以根据这些特点，再选择适合的聚合酶。

3、引物参考文献，GC含量有点低，一个34.2%。TM值引物合成单上为45℃，另一个为50℃，但参考文献上退火温度为55℃，扩增目的片段260bp。
赞一下 回复此楼
及时行乐，人生不留遗憾！
6楼2017-10-02 19:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oazkjp23


发自小木虫Android客户端
7楼2017-10-02 20:08:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

这里名字

新虫 (初入文坛)
我也是，做等温，咋做都没有目的片段

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-10-02 21:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiazhuangxue

新虫 (初入文坛)
换个酶吧，

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
9楼2018-01-11 15:22:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 新人求帮助 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 349求调剂 +5 李木子啊哈哈 2026-03-25 5/250 2026-03-29 10:22 by 唐沐儿
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +9 丹青奶盖 2026-03-26 10/500 2026-03-28 07:45 by barnett0632
[考研] 求调剂 +8 张zz111 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:41 by fmesaito
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 307求调剂 +8 超级伊昂大王 2026-03-24 9/450 2026-03-27 15:34 by 超级伊昂大王
[考研] 287求调剂 +10 land xuxu 2026-03-26 10/500 2026-03-27 15:33 by 帕尔马拉特
[考研] 化学308分求调剂 +8 你好明天你好 2026-03-23 9/450 2026-03-27 14:01 by 杨光于青云
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 352求调剂 +4 大米饭！ 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。，。，。，。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭