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新虫 (初入文坛)

[求助] pcr没有条带 已有1人参与

我有两条相同来源的基因序列,其功能也相似,但是其中一条扩增不出来,另一条却可以,模板是一样的基因组。扩增不出来的序列是1400bp左右,引物设计的是同源重组的引物,一条tm值是59.4,一条是62.6,我做梯度pcr从50到62都没有条带

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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Mannix Li at 2017-10-02 18:09:43
模板有可能被降解了,或者是引物本来就和你基因序列结合不上

模板肯定没有问题,因为我另外一条基因能p出来,引物是按照基因序列设计的,应该不会有问题的吧

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4楼2017-10-02 18:31:22
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查看全部 9 个回答

Mannix Li

新虫 (初入文坛)

既然pcr没有条带,那就要考虑是不是引物问题或者模板问题

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2楼2017-10-02 18:08:45
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Mannix Li

新虫 (初入文坛)

模板有可能被降解了,或者是引物本来就和你基因序列结合不上

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3楼2017-10-02 18:09:43
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香蕉芒果99

新虫 (小有名气)

多设计几条引物,筛选出可以用的。

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5楼2017-10-02 19:05:25
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