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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 怎么选择克隆载体和表达载体
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x8m8q8

新虫 (小有名气)

[求助] 怎么选择克隆载体和表达载体 已有1人参与

怎么选择克隆载体和表达载体，构建基因工程菌实验中什么时候用到这两种载体？
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1楼 2017-09-06 09:55:35
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苏哲然

新虫 (小有名气)
我也想问这样的问题

发自小木虫Android客户端
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古老而不可思议，深爱并异想天开
2楼2017-09-06 10:00:02
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mayunhui

新虫 (正式写手)
做基因表达的时候啊，首先要把基因克隆出来，然后再用表达载体做表达。但是现在很多都是直接克隆和表达一起做了，也就是说只用一种载体即可。
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x8m8q8
书到用时方恨少
3楼2017-09-07 11:10:20
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极北小白熊

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mayunhui at 2017-09-07 11:10:20
做基因表达的时候啊，首先要把基因克隆出来，然后再用表达载体做表达。但是现在很多都是直接克隆和表达一起做了，也就是说只用一种载体即可。

想问一下，表达载体一般有什么选择原则吗

发自小木虫Android客户端
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4楼2017-09-07 14:21:21
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x8m8q8

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by mayunhui at 2017-09-07 11:10:20
做基因表达的时候啊，首先要把基因克隆出来，然后再用表达载体做表达。但是现在很多都是直接克隆和表达一起做了，也就是说只用一种载体即可。

可以一起做呀，是直接把目的基因和抗性标记基因直接克隆到表达载体上，然后进行连接转化等操作吗？
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5楼2017-09-07 16:44:36
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alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-08 07:44:59
克隆载体可以选择使用表达载体直接克隆。
原则就是你需要什么多克隆位点？tag？cleavage site？等等，当然，最重要的是你的实验室有没有这个载体或者在你们实验室范围内可以借到的载体
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修身、齐家、治国、平天下
6楼2017-09-08 02:25:04
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mayunhui

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by x8m8q8 at 2017-09-07 16:44:36
可以一起做呀，是直接把目的基因和抗性标记基因直接克隆到表达载体上，然后进行连接转化等操作吗？...

对的，抗性标记基因一般都是直接包含在载体上的，无须克隆；只须将目的基因克隆到表达载体上即可。
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书到用时方恨少
7楼2017-09-08 09:27:44
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mayunhui

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 极北小白熊 at 2017-09-07 14:21:21
想问一下，表达载体一般有什么选择原则吗
...

原则谈不上吧，载体的选择肯定要是不同的情况而定：比如说你要选择的宿主菌是哪一种，你需要克隆并表达的基因有多大；等等。不同情况下，载体的选择肯定不一样啊。
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书到用时方恨少
8楼2017-09-08 09:30:07
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