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wlc0206

新虫 (初入文坛)

[求助] 需要做EMSA和ChIP实验确定靶基因,前期蛋白纯化方案应如何选择? 已有1人参与

要做染色质免疫共沉淀和凝胶阻滞实验确定与我已知的蛋白相互作用的靶基因,现在已经构建完原核表达载体,诱导表达后以包涵体的形式存在,但不知道该怎么纯化蛋白来制备多克隆抗体,现在方案有2个。
1.直接跑变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后切胶,用液氮研磨后直接注射动物获得多克隆抗体;
2.过柱子用咪唑梯度洗脱,复性后再注射动物。
哪个方案比较可行呢?
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wangtao89hf

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-06 09:09:05
第二个还是比较靠谱,切胶回收不一定能保证活性,而且回收的产物低
2楼2015-01-05 22:09:25
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