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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr出来的基因测序没有信号
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bigbei

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr出来的基因测序没有信号

p出来的基因，连到了t载体，挑白斑之后摇菌，用我p出这个基因的引物鉴定，跑胶结果对，然后送测序，用的也是这个引物，没信号。这到底是什么原因啊？

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1楼 2017-09-04 21:30:00
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mlxmiao

木虫 (著名写手)
换T载体上的引物检测一下看

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2楼2017-09-04 22:12:19
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bigbei

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mlxmiao at 2017-09-04 22:12:19
换T载体上的引物检测一下看

那请问您一下，用p出基因的引物鉴定，鉴定出来的东西是怎么来的啊？

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3楼2017-09-04 22:21:58
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jie_1994

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bigbei at 2017-09-04 22:21:58
那请问您一下，用p出基因的引物鉴定，鉴定出来的东西是怎么来的啊？
...

可能是你本身的PCR产物未连到载体上直接转化到感受态细胞里了。

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4楼2017-09-06 10:58:08
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bigbei

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jie_1994 at 2017-09-06 10:58:08
可能是你本身的PCR产物未连到载体上直接转化到感受态细胞里了。
...

这样不成环不会被降解吗，可能被转进去，并存在吗？

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5楼2017-09-07 11:27:36
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