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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序问题
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曼陀罗爱上黑夜

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序问题 已有5人参与

设计引物做pcr，产物电泳后条带很亮，可是为什么测序总是测不出来，测序结果总是失败？

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1楼 2017-08-24 15:23:54
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曼陀罗爱上黑夜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 18253592055 at 2017-08-24 19:12:41
之前有把pcr产物直接送去测序，pcr产物测序需要很高的浓度，你最好胶回收后测一下浓度，一种可能是虽然胶很亮但回收效率不高，这个除了测浓度你可以回收完取一点再跑一次胶看一下，看看亮度怎么样。另一种可能是那个 ...

纯化我也试过了，电泳条带挺亮的，还是测不出来

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9楼2017-08-24 20:09:49
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bbass533

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:34:23
本帖内容被屏蔽
2楼2017-08-24 15:25:36
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luoyl210

新虫 (著名写手)
送克隆菌去测序会好一些

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3楼2017-08-24 15:37:27
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曼陀罗爱上黑夜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbass533 at 2017-08-24 15:25:36
不建议送pcr产物去测序，最好是连接载体再测。不然会出现很多你想不出来的问题

原来是这样啊！可是连载体不会很麻烦吗？什么防止载体自连还有粘性末端什么的

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4楼2017-08-24 15:58:48
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