24小时热门版块排行榜    

查看: 1783  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1361120671

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于钙离子荧光探针fluo-3的问题 已有1人参与

哪位朋友在植物细胞上应用过fluo-3探针,最近做了很多次实验,不知道什么问题,总是检测不到钙离子荧光,在荧光显微镜下观察,什么都看不到。细胞原生质体活力用FDA检测过了,没有问题。请有经验的朋友帮帮忙。万分感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯狂的熊猫

新虫 (正式写手)

我想问下楼主有遇到过像钙离子荧光探针Fluo3-AM孵化叶片下表皮保卫细胞的时候,表皮一直飘在染液上的问题吗?还有我用的汞灯绿光激发,感觉效果不怎么好啊。

发自小木虫Android客户端
6楼2017-12-17 02:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、检测前细胞洗干净,不要有血清干扰
2、确定fluo-3探针没有过期,荧光没有淬灭
3、荧光显微镜分辨率不高
4、可以试试加长孵育时间,少清洗一遍
5、加大fluo-3探针浓度(实验结果都是对比出来的,每组处理一样就可以,加的多少及孵育时间多上的影响不大的)

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-08-21 16:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1361120671

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-21 16:40:22
1、检测前细胞洗干净,不要有血清干扰
2、确定fluo-3探针没有过期,荧光没有淬灭
3、荧光显微镜分辨率不高
4、可以试试加长孵育时间,少清洗一遍
5、加大fluo-3探针浓度(实验结果都是对比出来的,每组处理一样 ...

想问您一下,如何确定是否发生荧光淬灭?还有就是如果用激光共聚焦显微镜效果是不是好很多

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-23 11:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ywwabc

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1361120671 at 2017-08-23 11:10:40
想问您一下,如何确定是否发生荧光淬灭?还有就是如果用激光共聚焦显微镜效果是不是好很多
...

是的,共聚焦对荧光灵敏一些,是否发生淬灭那就试试标记细胞后先别清洗,直接看,如果有很强的荧光,那就说明没有淬灭或者淬灭的不严重,还是可以用的,如果不清洗看的荧光就很弱,那就说明用不成了啊
4楼2017-08-23 16:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +17 Lanmanbaby 2026-08-09 29/1450 2026-08-12 00:24 by zhanghaozhu
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见