应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 关于钙离子荧光探针fluo-3的问题
51/1返回列表
查看: 1772  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

1361120671

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于钙离子荧光探针fluo-3的问题 已有1人参与

哪位朋友在植物细胞上应用过fluo-3探针，最近做了很多次实验，不知道什么问题，总是检测不到钙离子荧光，在荧光显微镜下观察，什么都看不到。细胞原生质体活力用FDA检测过了，没有问题。请有经验的朋友帮帮忙。万分感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-08-17 18:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1361120671

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-21 16:40:22
1、检测前细胞洗干净，不要有血清干扰
2、确定fluo-3探针没有过期，荧光没有淬灭
3、荧光显微镜分辨率不高
4、可以试试加长孵育时间，少清洗一遍
5、加大fluo-3探针浓度（实验结果都是对比出来的，每组处理一样 ...

想问您一下，如何确定是否发生荧光淬灭？还有就是如果用激光共聚焦显微镜效果是不是好很多

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2017-08-23 11:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、检测前细胞洗干净，不要有血清干扰
2、确定fluo-3探针没有过期，荧光没有淬灭
3、荧光显微镜分辨率不高
4、可以试试加长孵育时间，少清洗一遍
5、加大fluo-3探针浓度（实验结果都是对比出来的，每组处理一样就可以，加的多少及孵育时间多上的影响不大的）
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

1361120671
2楼2017-08-21 16:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ywwabc

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 1361120671 at 2017-08-23 11:10:40
想问您一下，如何确定是否发生荧光淬灭？还有就是如果用激光共聚焦显微镜效果是不是好很多
...

是的，共聚焦对荧光灵敏一些，是否发生淬灭那就试试标记细胞后先别清洗，直接看，如果有很强的荧光，那就说明没有淬灭或者淬灭的不严重，还是可以用的，如果不清洗看的荧光就很弱，那就说明用不成了啊
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-08-23 16:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1361120671

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-23 16:50:20
是的，共聚焦对荧光灵敏一些，是否发生淬灭那就试试标记细胞后先别清洗，直接看，如果有很强的荧光，那就说明没有淬灭或者淬灭的不严重，还是可以用的，如果不清洗看的荧光就很弱，那就说明用不成了啊...

好的谢谢。我再试试看

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-08-23 20:38:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +5 布布和一二 2026-08-08 8/400 2026-08-08 14:54 by archvillain
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +11 且听虎啸 2026-08-07 14/700 2026-08-08 12:50 by 布布和一二
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭