24小时热门版块排行榜    

查看: 1830  |  回复: 6

1361120671

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于钙离子荧光探针fluo-3的问题 已有1人参与

哪位朋友在植物细胞上应用过fluo-3探针,最近做了很多次实验,不知道什么问题,总是检测不到钙离子荧光,在荧光显微镜下观察,什么都看不到。细胞原生质体活力用FDA检测过了,没有问题。请有经验的朋友帮帮忙。万分感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、检测前细胞洗干净,不要有血清干扰
2、确定fluo-3探针没有过期,荧光没有淬灭
3、荧光显微镜分辨率不高
4、可以试试加长孵育时间,少清洗一遍
5、加大fluo-3探针浓度(实验结果都是对比出来的,每组处理一样就可以,加的多少及孵育时间多上的影响不大的)

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-08-21 16:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1361120671

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-21 16:40:22
1、检测前细胞洗干净,不要有血清干扰
2、确定fluo-3探针没有过期,荧光没有淬灭
3、荧光显微镜分辨率不高
4、可以试试加长孵育时间,少清洗一遍
5、加大fluo-3探针浓度(实验结果都是对比出来的,每组处理一样 ...

想问您一下,如何确定是否发生荧光淬灭?还有就是如果用激光共聚焦显微镜效果是不是好很多

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-23 11:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ywwabc

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1361120671 at 2017-08-23 11:10:40
想问您一下,如何确定是否发生荧光淬灭?还有就是如果用激光共聚焦显微镜效果是不是好很多
...

是的,共聚焦对荧光灵敏一些,是否发生淬灭那就试试标记细胞后先别清洗,直接看,如果有很强的荧光,那就说明没有淬灭或者淬灭的不严重,还是可以用的,如果不清洗看的荧光就很弱,那就说明用不成了啊
4楼2017-08-23 16:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1361120671

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-23 16:50:20
是的,共聚焦对荧光灵敏一些,是否发生淬灭那就试试标记细胞后先别清洗,直接看,如果有很强的荧光,那就说明没有淬灭或者淬灭的不严重,还是可以用的,如果不清洗看的荧光就很弱,那就说明用不成了啊...

好的谢谢。我再试试看

发自小木虫Android客户端
5楼2017-08-23 20:38:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯狂的熊猫

新虫 (正式写手)

我想问下楼主有遇到过像钙离子荧光探针Fluo3-AM孵化叶片下表皮保卫细胞的时候,表皮一直飘在染液上的问题吗?还有我用的汞灯绿光激发,感觉效果不怎么好啊。

发自小木虫Android客户端
6楼2017-12-17 02:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trickletof

铜虫 (初入文坛)

你好,求助贴。1.钙离子荧光探针,是哪家公司?求推荐。2.使用激光共聚焦的前处理有试验方法,方便的话,可以交流一下。3.可以对植物的任何组织进行染色吗?
7楼2021-06-27 22:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1361120671 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:39 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:03 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:51 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:15 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:39 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[教师之家] 现代”学阀”该如何界定 +3 iaeyuan 2026-09-19 3/150 2026-09-19 20:52 by 没昵称呀
[基金申请] 国社科系统bug了,是不是要放榜了? +7 kynobel 2026-09-16 9/450 2026-09-19 14:52 by 接好运婷
[考博] 申博发邮件 +8 Lmengk 2026-09-15 9/450 2026-09-19 09:27 by 中间体超市
[有机交流] 各位大神,目前国内有哪些比较好用的逆合成软件? 20+3 zapen 2026-09-15 9/450 2026-09-18 18:17 by zapen
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组|2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
信息提示
请填处理意见