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gateway中'LR反应 已有2人参与
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做该反应时对感受态有什么要求吗望告知，我有DH5&感受态和TransDB3.1的感受态，分不清用哪个了 发自小木虫Android客户端 |
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7楼2017-08-02 13:14:02
晋鹏
版主 (知名作家)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+5, 鼓励回帖交流 2017-08-04 07:42:40
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Gateway技术是克隆和亚克隆DNA序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。 Gateway技术是基于已研究的非常清楚的λ噬菌体位点特异重组系统（attB x attP →attL x attR）。BP和LR两个反应就构成搜索了Gateway技术. BP反应是利用一个attB DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR反应是一个attL入门克隆和一个attR目的载体之间的重组反应。LR反应用来在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。 在BP反应中基因转移形成入门克隆，在LR反应中入门克隆可以作为反应物产生最终的表达克隆。 完成构建Gateway表达克隆仅需两步： （1）创建入门克隆，通过PCR或传统的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。 （2）混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体以及Gateway LR Clonase酶，构建表达克隆。（表达克隆用来在合适的宿主中进行蛋白的表达和分析。） |
2楼2017-08-01 16:07:36
3楼2017-08-01 16:13:29
4楼2017-08-01 16:32:32