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新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白表面疏水性 已有1人参与

测肌原纤维蛋白表面疏水性的方法除了荧光探针法,我用的是化学方法,如下:
1ml 0.1%的肌原纤维蛋白加200微升的溴酚蓝,对照为1ml的pH6.0,,2mM的磷酸缓冲液,空白为磷酸缓冲液,震荡10min,2000r离心15min,取上清液稀释10倍,595nm处测吸光值。请问这种方法的结果跟荧光法得出的结果有什么区别吗?表征的含义是一样的吗?能反应蛋白三级结构的变化吗?
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13122327737

新虫 (初入文坛)

13122327737: 回帖置顶 2017-07-31 16:39:57
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-30 23:19:28
1、表征一般包括以下内容:
一级结构和翻译后修饰       
- 完整蛋白分子量和还原分子量
- 液质联用肽谱图分析
- 糖基化分析
- 二硫键分析
- N 端和 C 端确证
活性分析       
- 抗原结合分析

2、测肌原纤维蛋白 ...

谢谢您的回复,我的结果是  溴酚蓝结合量(微克)=200微克*(A对照-A样品)/A对照。我想问一下,这个200微克是固定的吗?还有上面的那个稀释倍数,我是稀释了10倍,如果我稀释50倍,对结果有影响吗?因为公式里面并没有稀释倍数这个因子。
3楼2017-07-31 16:39:02
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13122327737

新虫 (初入文坛)

13122327737: 回帖置顶 2017-08-01 20:04:40
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-30 23:19:28
1、表征一般包括以下内容:
一级结构和翻译后修饰       
- 完整蛋白分子量和还原分子量
- 液质联用肽谱图分析
- 糖基化分析
- 二硫键分析
- N 端和 C 端确证
活性分析       
- 抗原结合分析

2、测肌原纤维蛋白 ...

谢谢您的回复,我的结果是  溴酚蓝结合量(微克)=200微克*(A对照-A样品)/A对照。我想问一下,这个200微克是固定的吗?还有上面的那个稀释倍数,我是稀释了10倍,如果我稀释50倍,对结果有影响吗?因为公式里面并没有稀释倍数这个因子。
4楼2017-07-31 16:39:06
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普通回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、表征一般包括以下内容:
一级结构和翻译后修饰       
- 完整蛋白分子量和还原分子量
- 液质联用肽谱图分析
- 糖基化分析
- 二硫键分析
- N 端和 C 端确证
活性分析       
- 抗原结合分析

2、测肌原纤维蛋白表面疏水性的方法,两者差异是存在的,但是都可以得到结论。

3、利用荧光探针技术研究蛋白质在溶液中的构象有两种方法:一种是测定蛋白质分子的自身荧光,即“内源荧光”,另一种是利用荧光探测剂,即“外源荧光”。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-30 23:19:28
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zss2

新虫 (初入文坛)

请问楼主做出来了吗?我最近做这个实验,样品的吸光度有的低于对照组的吸光度?请问楼主有遇到这种问题吗?
5楼2022-11-03 15:15:05
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