| 查看: 1895 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
碧川新虫 (小有名气)
|
[求助]
测乙酰胆碱酯酶抑制活性 已有1人参与
|
|
|
用国产96孔板测的，为什么阴性对照组的OD值比空白组还要小啊。难不成是误差？会不会太大了。 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
295求调剂
已经有3人回复
-
一志愿C9的化学工程（085602） 340分，感觉校内调剂无望，求调剂
已经有9人回复
-
070300化学求调剂
已经有16人回复
-
363求调剂
已经有4人回复
-
283分求调剂
已经有3人回复
-
材料化工306分找合适调剂
已经有7人回复
-
一志愿北京化工085600 310分求调剂
已经有4人回复
-
292求调剂
已经有9人回复
-
调剂
已经有4人回复
-
一志愿9材料学硕297已过六级求调剂推荐
已经有5人回复
12楼2021-03-22 23:26:21
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
硫代乙酰胆碱(ATch)在乙酰胆碱酯酶(AChE)作用下分解,生成硫代胆碱,硫代胆碱与显色剂二硫代二硝基苯甲酸（DTNB)迅速作用,生成在412 nm处有光吸收的黄色物质,在酶催化反应的稳态阶段其 OD 值即可代表起始反应速率。 方法： 2.65 mLPBS(pH 8.0),50μL 乙酰胆碱酯酶(0.85 U/mL) , 100 μL 15 mM DTNB 和样品溶液100μL加入试管，37 ℃预热 2 min，然后加入100 μL15 mM 硫代乙酰胆碱（起始浓度是0.5 mM），在 37 ℃ 保温 20 min 后立即加入1 mL 0.4％SDS 终止反应，将所得溶液立即在412nm下测量吸光值并根据下式计算抑制率： 抑制率(％)=[A对照-(A 样品-A 样品空白)]/A对照×100。 按照公式计算抑制率，以横坐标为酶促反应体系中抑制剂的浓度，纵坐标为抑制率，绘制曲线，计算其抑制率为50%时的抑制剂浓度，即为IC50。 |
2楼2017-07-17 23:59:51
3楼2017-08-06 10:43:32
碧川
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 432.5
- 散金: 120
- 帖子: 219
- 在线: 13.1小时
- 虫号: 6351654
- 注册: 2017-04-19
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
|
我是根据文献做的，140μL0.1M PB＋20μL待测样品DMSO溶液＋20μL0.09u/ml酶溶液 混合 25℃孵化15min 再加10μL14mM ATCl 与10μL 14mM DTNB 10min后 410nm测OD值 毒扁豆碱作为阳性对照 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-08-09 09:53:05
