| 查看: 1975 | 回复: 3 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
天宇201266金虫 (正式写手)
|
[求助]
不对称PCR扩增出单链DNA后，胶回收浓度很低 已有2人参与
|
|
| 最近做不对称PCR扩增单链DNA，不对称PCR产物经琼脂糖凝胶电泳回收后，浓度很低，这是为什么？求大神指导，单链DNA是被降解了吗？还是因为自己所有的试剂盒不行，自己用的试剂盒是天根胶回收试剂盒，求指导！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有298人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
qinshouhudie
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 220.4
- 散金: 4
- 帖子: 28
- 在线: 77.3小时
- 虫号: 882677
- 注册: 2009-10-24
- 专业: 光谱分析
4楼2021-10-31 08:18:40
晋鹏
版主 (知名作家)
- MolEPI: 6
- 应助: 626 (博士)
- 贵宾: 0.096
- 金币: 27592.6
- 散金: 1052
- 红花: 288
- 沙发: 2
- 帖子: 5663
- 在线: 726.4小时
- 虫号: 1183978
- 注册: 2011-01-05
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
- 管辖: 农林
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天宇201266: 金币+2 2017-07-13 08:06:09
感谢参与，应助指数 +1
天宇201266: 金币+2 2017-07-13 08:06:09
|
1、其实DNA浓度低也不是就不能用，你只要上1ul跑电泳能看见条带就行了。浓度低连接时可以扩大体系，用20-30ul体系，不加水了，全用DNA补齐，连接酶也多加。 2、如果试剂盒没问题的话，考虑一下片段大小。如果太小的话（500bp或以下）， 加入结合液后，向其中再加入1/3体积的异丙醇，然后按操作说明书操作。溶胶一定要非常仔细，并且彻底！溶胶以后，注意体系的pH值，如果pH值太高，也会影响回收。 3、简单点的就是用胶回收盒子里面的柱子重新富集一遍。加大PCR产物。我一般都是做50ul体系，做几个，跑胶后，切胶一起回收，电泳检测浓度。 |
2楼2017-07-11 08:33:35
elmanbio
金虫 (小有名气)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 1058.2
- 散金: 71
- 红花: 7
- 帖子: 255
- 在线: 152.3小时
- 虫号: 7000480
- 注册: 2017-07-28
- 专业: 人类遗传学
3楼2018-01-05 17:10:48
20