应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因克隆全长
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1910  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

18280933482

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆全长 已有1人参与

本人没有做过分子相关的实验，但导师突然叫我做个基因克隆（是做基因全长），作为毕业论文的一部分。但是我现在第一步就不知道怎么做了(请各位帮我一下），我有在NCBI里找该基因(我是克隆鱼的DDB1基因)序列，但是发现只有部分物种有这个基因的序列，而且这些物种同源性不高，我该怎么做？希望各位大牛帮我解答一下！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2017-07-04 07:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18280933482

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mayunhui at 2017-07-05 11:13:03
是从基因组中克隆还是从cDNA中克隆？

是从cdna

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2017-07-06 20:02:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

mayunhui

新虫 (正式写手)
是从基因组中克隆还是从cDNA中克隆？
赞一下 回复此楼
书到用时方恨少
2楼2017-07-05 11:13:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-07-06 12:32:08
1、首先，你应该改变你的认识“只有部分物种有这个基因的序列，而且这些物种同源性不高”，如果都被研究透彻了，那你做这个工作的创新点在哪里呢？

2、既然你需要“克隆鱼的DDB1基因”，检索NCBI，目前已经克隆报道的DDB1基因有169个，包括动物、植物和微生物。

3、研究对象为鱼，可以以斑马鱼为例啊，已报道的斑马鱼DDB1基因有3个：

ID: 393599
damage-specific DNA binding protein 1 [Danio rerio (zebrafish)]        Chromosome 18, NC_007129.7 (50826591..50839096, complement)        zgc:63840

ID: 449848
X-ray repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 5 [Danio rerio (zebrafish)]        Chromosome 9, NC_007120.7 (52558181..52597667, complement)        Ku80, im:7137560, si:ch211-239d11.4


ID: 100004133
damage-specific DNA binding protein 2 [Danio rerio (zebrafish)]        Chromosome 18, NC_007129.7 (20468151..20479334)        si:dkey-45f10.3

建议以Gene ID: 393599，为同源模板，设计引物，克隆即可。
赞一下(1人) 回复此楼
及时行乐，人生不留遗憾！
3楼2017-07-06 10:18:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18280933482

新虫 (初入文坛)
好的，非常谢谢！还想请问一下设计引物我需要加上酶切位点吗？还有一个是做race是不是有5'端特别不好扩出来？我有什么技巧没？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-07-06 20:14:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 7/350 2026-03-28 21:40 by zhq0425
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +7 幸运哩哩 2026-03-22 11/550 2026-03-28 20:27 by 唐沐儿
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +4 26要上岸 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:30 by 1018329917
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 复试调剂，一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +5 SYA！ 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 300分，材料，求调剂，英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭