24小时热门版块排行榜    

查看: 4519  |  回复: 7

ziying12590

铜虫 (小有名气)

[求助] 用普通的TAQ酶可以扩增出基因条带,用高保真酶扩增不出来了该怎么办呢 已有1人参与

用普通的TAQ酶可以扩增出基因条带,用高保真酶扩增不出来了,延长退火时间会出现很弱的目的条带,但非特异扩增严重。请问下大神这种情况该怎么办呢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-29 22:45:56
没办法,直接用普通酶做,你应该是用来测序的吧,多测一下就行了。
或者你改变一下退火温度,跑一个touchdow PCR试一下
生活活生生累死
2楼2017-06-29 20:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2017-06-29 21:00:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ziying12590

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bio转录组 at 2017-06-29 20:05:49
没办法,直接用普通酶做,你应该是用来测序的吧,多测一下就行了。
或者你改变一下退火温度,跑一个touchdow PCR试一下

跑了个降落,居然不同公司的酶跑出来情况不一样,有一个公司的酶跑出来了,但条带很弱,怎么改进呢

发自小木虫Android客户端
4楼2017-07-01 08:15:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

598878157

版主 (文学泰斗)

rky

5楼2017-07-01 08:32:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio转录组

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ziying12590 at 2017-07-01 08:15:09
跑了个降落,居然不同公司的酶跑出来情况不一样,有一个公司的酶跑出来了,但条带很弱,怎么改进呢
...

感觉应该是引物设计的问题1重新设计一对引物试试,还有一个方法,用第一轮pcr产物当做模板,稀释10倍,跑pcr试试

发自小木虫Android客户端
生活活生生累死
6楼2017-07-01 14:14:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzau103

新虫 (正式写手)

再换几个公司的试试 可以问不同牌子的要试用装

发自小木虫Android客户端
7楼2017-07-01 15:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuhang91

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

8楼2017-10-21 13:12:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ziying12590 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见