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用普通的TAQ酶可以扩增出基因条带,用高保真酶扩增不出来了该怎么办呢
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ziying12590
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用普通的TAQ酶可以扩增出基因条带,用高保真酶扩增不出来了该怎么办呢
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用普通的TAQ酶可以扩增出基因条带,用高保真酶扩增不出来了,延长退火时间会出现很弱的目的条带,但非特异扩增严重。请问下大神这种情况该怎么办呢
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2017-06-29 15:22:48
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2017-06-29 22:45:56
没办法,直接用普通酶做,你应该是用来测序的吧,多测一下就行了。
或者你改变一下退火温度,跑一个touchdow PCR试一下
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2017-06-29 20:05:49
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2楼
:
Originally posted by
bio转录组
at 2017-06-29 20:05:49
没办法,直接用普通酶做,你应该是用来测序的吧,多测一下就行了。
或者你改变一下退火温度,跑一个touchdow PCR试一下
跑了个降落,居然不同公司的酶跑出来情况不一样,有一个公司的酶跑出来了,但条带很弱,怎么改进呢
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2017-07-01 08:15:09
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4楼
:
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ziying12590
at 2017-07-01 08:15:09
跑了个降落,居然不同公司的酶跑出来情况不一样,有一个公司的酶跑出来了,但条带很弱,怎么改进呢
...
感觉应该是引物设计的问题1重新设计一对引物试试,还有一个方法,用第一轮pcr产物当做模板,稀释10倍,跑pcr试试
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2017-07-01 14:14:45
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再换几个公司的试试 可以问不同牌子的要试用装
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2017-07-01 15:30:11
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