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枫叶留殇
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[交流]
SDS-PAGE胶上杂带
各路大神:
最近在做重组蛋白的表达,图1是His-Trap纯化的结果,完全按照说明书上配置相应的buffer以及冲洗体积。(图片需反转)
图2是分子筛的纯化结果,图中最下面一条浓带是目的蛋白,但是很奇怪的是,最上面有一条杂带,分子量很大,但是却去除不了。不知道引起这条杂带的原因是什么?按说分子筛是一定能分开的。(图片需反转)
以前这个蛋白用的是镍柱柱胶纯化,重力柱;现在用的是预装柱,不知道要怎么改善条件才不会出现这种现象啊。
跪谢!!
图1.jpg
图2.jpg
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2017-06-28 20:30:38
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莫落
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你的目的蛋白很小啊,从胶上看应该不存在相互作用,建议更换分子筛。不过你这纯度应该可以了啊
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9楼
2017-06-29 10:15:26
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枫叶留殇
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9楼
:
Originally posted by
莫落
at 2017-06-29 10:15:26
你的目的蛋白很小啊,从胶上看应该不存在相互作用,建议更换分子筛。不过你这纯度应该可以了啊
就是不知道最上面一条是什么呢,感觉应该能分开,我用的是G75的柱子
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13楼
2017-06-29 14:50:21
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laom2013
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