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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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粥-小菜

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 霍乱弧菌的特异性基因扩增(lolB?)

现在在做水产品中霍乱弧菌的分离鉴定,方法是先用PBS制作菌悬液,再涂布到TCBS琼脂培养基上,培养12-18h,挑取黄色可疑单菌落至TSB液体培养基上,14h左右,再吸取菌液热裂解作为DNA模板扩增特异性基因lolB,每次都挑取150个左右来做,但是只有1,2个,而且条带很弱。现在怀疑是不是扩增的目的基因不是这个lolB基因。还是其他地方错了,导致检出率这么低。新手,希望知道的大神们可以给予指点,谢谢!
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无所畏惧,春暖花开
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许彦

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

2楼2017-06-28 07:07:40
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粥-小菜

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2017-06-28 07:07:40
条带大小一样吗,

一样的,都在519bp
无所畏惧,春暖花开
3楼2017-07-04 10:58:05
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许彦

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

你本身这对引物要求的片段大小是多少,还有你们可以选择商品化试剂盒吗?

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-07-04 11:19:40
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粥-小菜

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
4楼: Originally posted by 许彦 at 2017-07-04 11:19:40
你本身这对引物要求的片段大小是多少,还有你们可以选择商品化试剂盒吗?

要求的片段大小是519bp,选用的是100bp的Marker,几个扩出来的在500bp附近,不确定到底是不是519bp.然后之后我就一直用第一次筛出来的一株的DNA来做阳性对照
在初筛阶段,试剂盒导师好像不给用,太浪费了
无所畏惧,春暖花开
5楼2017-07-04 12:33:16
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许彦

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
5楼: Originally posted by 粥-小菜 at 2017-07-04 12:33:16
要求的片段大小是519bp,选用的是100bp的Marker,几个扩出来的在500bp附近,不确定到底是不是519bp.然后之后我就一直用第一次筛出来的一株的DNA来做阳性对照
在初筛阶段,试剂盒导师好像不给用,太浪费了...

可以把有条带的测序看看

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6楼2017-07-05 05:31:53
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