24小时热门版块排行榜    

查看: 1334  |  回复: 5

粥-小菜

新虫 (初入文坛)

[求助] 霍乱弧菌的特异性基因扩增(lolB?)

现在在做水产品中霍乱弧菌的分离鉴定,方法是先用PBS制作菌悬液,再涂布到TCBS琼脂培养基上,培养12-18h,挑取黄色可疑单菌落至TSB液体培养基上,14h左右,再吸取菌液热裂解作为DNA模板扩增特异性基因lolB,每次都挑取150个左右来做,但是只有1,2个,而且条带很弱。现在怀疑是不是扩增的目的基因不是这个lolB基因。还是其他地方错了,导致检出率这么低。新手,希望知道的大神们可以给予指点,谢谢!
回复此楼
无所畏惧,春暖花开
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

条带大小一样吗,

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-06-28 07:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

粥-小菜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2017-06-28 07:07:40
条带大小一样吗,

一样的,都在519bp
无所畏惧,春暖花开
3楼2017-07-04 10:58:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

你本身这对引物要求的片段大小是多少,还有你们可以选择商品化试剂盒吗?

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-07-04 11:19:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

粥-小菜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 许彦 at 2017-07-04 11:19:40
你本身这对引物要求的片段大小是多少,还有你们可以选择商品化试剂盒吗?

要求的片段大小是519bp,选用的是100bp的Marker,几个扩出来的在500bp附近,不确定到底是不是519bp.然后之后我就一直用第一次筛出来的一株的DNA来做阳性对照
在初筛阶段,试剂盒导师好像不给用,太浪费了
无所畏惧,春暖花开
5楼2017-07-04 12:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 粥-小菜 at 2017-07-04 12:33:16
要求的片段大小是519bp,选用的是100bp的Marker,几个扩出来的在500bp附近,不确定到底是不是519bp.然后之后我就一直用第一次筛出来的一株的DNA来做阳性对照
在初筛阶段,试剂盒导师好像不给用,太浪费了...

可以把有条带的测序看看

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-07-05 05:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 粥-小菜 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +7 Tide man 2026-08-10 8/400 2026-08-11 15:49 by 铁帽子农民
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见