24小时热门版块排行榜    

查看: 1332  |  回复: 5

粥-小菜

新虫 (初入文坛)

[求助] 霍乱弧菌的特异性基因扩增(lolB?)

现在在做水产品中霍乱弧菌的分离鉴定,方法是先用PBS制作菌悬液,再涂布到TCBS琼脂培养基上,培养12-18h,挑取黄色可疑单菌落至TSB液体培养基上,14h左右,再吸取菌液热裂解作为DNA模板扩增特异性基因lolB,每次都挑取150个左右来做,但是只有1,2个,而且条带很弱。现在怀疑是不是扩增的目的基因不是这个lolB基因。还是其他地方错了,导致检出率这么低。新手,希望知道的大神们可以给予指点,谢谢!
回复此楼
无所畏惧,春暖花开
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

条带大小一样吗,

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-06-28 07:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

粥-小菜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2017-06-28 07:07:40
条带大小一样吗,

一样的,都在519bp
无所畏惧,春暖花开
3楼2017-07-04 10:58:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

你本身这对引物要求的片段大小是多少,还有你们可以选择商品化试剂盒吗?

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-07-04 11:19:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

粥-小菜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 许彦 at 2017-07-04 11:19:40
你本身这对引物要求的片段大小是多少,还有你们可以选择商品化试剂盒吗?

要求的片段大小是519bp,选用的是100bp的Marker,几个扩出来的在500bp附近,不确定到底是不是519bp.然后之后我就一直用第一次筛出来的一株的DNA来做阳性对照
在初筛阶段,试剂盒导师好像不给用,太浪费了
无所畏惧,春暖花开
5楼2017-07-04 12:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 粥-小菜 at 2017-07-04 12:33:16
要求的片段大小是519bp,选用的是100bp的Marker,几个扩出来的在500bp附近,不确定到底是不是519bp.然后之后我就一直用第一次筛出来的一株的DNA来做阳性对照
在初筛阶段,试剂盒导师好像不给用,太浪费了...

可以把有条带的测序看看

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-07-05 05:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 粥-小菜 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +15 Lanmanbaby 2026-08-09 23/1150 2026-08-11 09:51 by demonstreets
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +5 瞬息宇宙 2026-08-10 5/250 2026-08-11 09:29 by 铁帽子农民
[基金申请] 帮忙看看fileCode +6 wwncly 2026-08-10 11/550 2026-08-11 09:14 by xiaruohan
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见