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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱峰分离度不够
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夏一刻

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱峰分离度不够 已有3人参与

测定血清25-oh d2和d3两种物质。流动相:乙腈+水(85+15)，0.8ml/min，40摄氏度，进样20μl，新买的岛津c18柱子。标线峰形很好。样品含量峰面积在5000左右。试过调温度到50度，改变不大(出峰时间为18.2min和21.6min的两个峰)。不知道这种情况该上调有机相比例还是下调有机相比例？求大神指点

液相色谱峰分离度不够


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1楼 2017-06-17 19:56:58
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mao877516786

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以尝试改一下梯度，可能效果会好些
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2楼2017-06-17 21:38:26
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夏一刻

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mao877516786 at 2017-06-17 21:38:26
你可以尝试改一下梯度，可能效果会好些

用的是单泵的仪器，没办法改梯度

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3楼2017-06-17 22:21:33
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
纯粹分离度不好的话，一般都是调小有机相比例，看你这图谱，不是简单调流动相比例就能解决的
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4楼2017-06-18 08:19:34
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柳絮虫

新虫 (职业作家)
总觉得样品含量太低，看不到纵坐标，也说不好。估计，需要前处理。
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5楼2017-06-18 10:12:25
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夏一刻

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by t892893235 at 2017-06-18 08:19:34
纯粹分离度不好的话，一般都是调小有机相比例，看你这图谱，不是简单调流动相比例就能解决的

麻烦问下，我用的血清样，液液萃取(甲醇除蛋白，已烷萃取)得到的，样品杂峰较多，这种需要怎么调整流动相条件把目标峰和杂峰分开啊

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6楼2017-06-18 13:30:10
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夏一刻

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2017-06-18 10:12:25
总觉得样品含量太低，看不到纵坐标，也说不好。估计，需要前处理。

样品含量计算出来大约有80ppb左右

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7楼2017-06-18 13:39:29
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dingrongjin

金虫 (小有名气)
增大水相，降低有机相

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海纳百川，有容乃大
8楼2017-06-27 22:22:21
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am409279631

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是分离度不够  然后调整有机相比例的  我的是调高就好很多了  你这样的 是不是要调慢流速  会不会更好呢
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9楼2017-06-28 10:09:30
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Wwj和Amy

铁虫 (初入文坛)
也有可能是柱效不行了
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认真奋斗的90后
10楼2017-06-28 10:26:16
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