| 查看: 7580 | 回复: 22 | |||
[交流]
构建过表达载体和亚细胞定位GFP载体遇到的几点问题
|
|||
|
我的实验的方法 1、在克隆得到目的片段后，由公司返样和质粒。设计去终止密码子的引物，利用得到质粒进行PCR。 2、对过表达载体35S以、GFP载体及目的片段进行双酶切，然后连接。 3、得到阳性菌落，测序发现以下几个问题，希望能得到大家的帮助，也当做是讨论吧。 问题1：其中一个基因插入载体后为何依然出现了终止密码子？ 问题2：此时已经出现终止密码子，是否会影响后续的过表达以及亚细胞定位的工作？ 问题3：如果连接好的载体不能用作转基因，那有什么好的办法解决这个密码子？（难道重新设计引物再来一次？） 谢谢各位了~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
生物学296求调剂
已经有10人回复
-
288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行
已经有19人回复
-
086000生物与医药 初试274求调剂
已经有4人回复
-
315求调剂
已经有7人回复
-
288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工
已经有11人回复
-
求调剂
已经有9人回复
-
309求调剂
已经有16人回复
-
322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。
已经有10人回复
-
330分求调剂
已经有6人回复
-
317求调剂
已经有13人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
济南大学化学化工学院招收化学工程与技术、化学工程（学硕、专硕）研究生
+2/480
-
中国科学院过程工程研究所 能源环境课题组 博士后招聘启示
+1/188
-
【招聘】温州医科大学/附属医院/瓯江实验室李校堃院士团队诚聘博士后和科研人员
+1/183
-
双一流南京医科大学招计算机、AI、统计、生物信息等方向26年9月入学博士
+1/97
-
双一流南京医科大学招计算机、生物信息等方向调剂
+1/92
-
【招聘】清北（济南）生物科技招聘AI制药研发计算人才
+1/86
-
合肥工科211水利工程调剂招生
+1/52
-
大连工业大学纺织与材料工程学院超临界流体技术课题组 研究生调剂
+2/48
-
考研调剂!
+1/41
-
华东师范大学物理化学专业2026级博士研究生招生（第二批）
+1/39
-
【上海调剂急录】代码1007/1055/0806/0703./0780./0836等速点！！
+1/39
-
招收2026级环境科学方向（专业代码083001）硕士研究生1-2名
+1/36
-
西南科技大学李永升老师接收材料和化工类研究生调剂
+1/17
-
广东唯一石化院校——资源与环境专硕招生
+1/14
-
招聘科研助理——储能方向（储能、流体传热、CFD模拟）
+1/12
-
【调剂上岸】985联合培养！1007/1055/08..07..等，医药生化环材计算机，速来！
+1/7
-
江西科技师范大学 材料与能源招收调剂研究生
+1/6
-
原中山大学池振国教授的五邑大学团队大量接收2026化学化工材料背景考研生调剂
+1/6
-
齐齐哈尔大学李莉课题组诚招2026级考研调剂生（学硕和专硕）
+1/3
-
齐齐哈尔大学化学与化学工程学院招收专硕调剂
+1/3
13楼2017-06-14 09:25:12
14楼2017-06-25 14:08:39
|
谢谢您，我这个终止密码子是在基因序列的末端。我们载体本身酶切位点后是有终止密码子的，故而以前他们构建载体时候不论过表达还是细胞定位都不带终止密码子。不知道您们如何操作的 发自小木虫IOS客户端 |
16楼2017-06-26 08:52:08
17楼2017-06-26 09:45:26
20楼2017-07-21 23:56:15
21楼2017-11-01 20:55:18
简单回复
fdzjm2楼
2017-06-13 17:32
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫IOS客户端
浅语若水3楼
2017-06-13 17:57
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
^_^ 发自小木虫IOS客户端
2017-06-13 18:14
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫IOS客户端
艾思脉5楼
2017-06-13 18:14
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
^_^ 发自小木虫IOS客户端
2017-06-13 18:31
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
也是小白7楼
2017-06-13 18:38
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
？ 发自小木虫Android客户端
tzynew8楼
2017-06-13 19:11
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
2017-06-13 19:16
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
朝都10楼
2017-06-13 19:24
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
好 发自小木虫Android客户端
slytjiaofei11楼
2017-06-13 19:47
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
syhorchid12楼
2017-06-13 19:58
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
wdxmu15楼
2017-06-25 19:26
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
一 发自小木虫IOS客户端
万邦翻译18楼
2017-06-27 21:00
回复
wdxmu19楼
2017-06-27 21:32
回复
nono200922楼
2021-09-20 21:00
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
·
刀劈三关23楼
2021-09-27 13:38
回复
。
