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[交流]
构建过表达载体和亚细胞定位GFP载体遇到的几点问题
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我的实验的方法 1、在克隆得到目的片段后，由公司返样和质粒。设计去终止密码子的引物，利用得到质粒进行PCR。 2、对过表达载体35S以、GFP载体及目的片段进行双酶切，然后连接。 3、得到阳性菌落，测序发现以下几个问题，希望能得到大家的帮助，也当做是讨论吧。 问题1：其中一个基因插入载体后为何依然出现了终止密码子？ 问题2：此时已经出现终止密码子，是否会影响后续的过表达以及亚细胞定位的工作？ 问题3：如果连接好的载体不能用作转基因，那有什么好的办法解决这个密码子？（难道重新设计引物再来一次？） 谢谢各位了~~ |
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简单回复
fdzjm2楼
2017-06-13 17:32
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jiang6175(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫IOS客户端
浅语若水3楼
2017-06-13 17:57
回复
jiang6175(金币+1): 谢谢参与
^_^ 发自小木虫IOS客户端
2017-06-13 18:14
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jiang6175(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫IOS客户端
艾思脉5楼
2017-06-13 18:14
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jiang6175(金币+1): 谢谢参与
^_^ 发自小木虫IOS客户端
也是小白7楼
2017-06-13 18:38
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jiang6175(金币+1): 谢谢参与
？ 发自小木虫Android客户端
2017-06-13 19:16
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jiang6175(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
朝都10楼
2017-06-13 19:24
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jiang6175(金币+1): 谢谢参与
好 发自小木虫Android客户端