| 查看: 2955 | 回复: 4 | |||
[交流]
蛋白纯化不挂柱的一些问题 已有3人参与
|
| 我表达的融合蛋白带有his标签，跑蛋白胶看上清目的蛋白很多，但是做纯化一直挂不上柱，都在穿透峰溜走了。我推测是空间结构问题影响了挂住效果，试过8m尿素完全变形，纯化确实提高很多，但是蛋白变性就没有意义了。请教各位大神，有什么提高纯化效果的方法？？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有63人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- [HPLC常见问题]鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题
已经有54人回复
- 蛋白纯化问题，希望大家给我支支招，成分感谢
已经有41人回复
- NI柱纯化，杂质挥之不去
已经有3人回复
2511956298
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 165.9
- 红花: 5
- 帖子: 49
- 在线: 18.2小时
- 虫号: 2900966
- 注册: 2013-12-29
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-13 22:59:34
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-13 22:59:34
|
可以试试用加入少量的β-巯基乙醇，打开二硫键，然后在做纯化试试。。。个人想法 （百度搜索之后，发现的内容，借用别人的发给你） 原核细胞表达的包涵体经经反复洗涤后，8mol．L－1尿素溶解（完全变性了），加入复性液（成分：50 mmol．L－1 Tris-HCl,5mmol．L－1 EDTA,1mmol．L－1 氧化型谷光甘肽，5mmol．L－1 还原型谷光甘肽）稀释复性，10℃复性48h。 复性液中加入一定比例的氧化型谷光甘肽和还原型谷光甘肽更有利于蛋白复性。 |
2楼2017-06-13 09:22:29
3楼2017-06-13 09:58:25
liguanying
银虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 453.2
- 红花: 2
- 帖子: 46
- 在线: 18.8小时
- 虫号: 1695363
- 注册: 2012-03-16
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2017-06-13 22:31:53
5楼2018-08-25 12:44:23
