| 查看: 2865 | 回复: 4 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
蛋白纯化不挂柱的一些问题 已有3人参与
|
|||
| 我表达的融合蛋白带有his标签，跑蛋白胶看上清目的蛋白很多，但是做纯化一直挂不上柱，都在穿透峰溜走了。我推测是空间结构问题影响了挂住效果，试过8m尿素完全变形，纯化确实提高很多，但是蛋白变性就没有意义了。请教各位大神，有什么提高纯化效果的方法？？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有91人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- [HPLC常见问题]鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题
已经有54人回复
- 蛋白纯化问题，希望大家给我支支招，成分感谢
已经有41人回复
- NI柱纯化，杂质挥之不去
已经有3人回复
liguanying
银虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 453.2
- 红花: 2
- 帖子: 46
- 在线: 18.8小时
- 虫号: 1695363
- 注册: 2012-03-16
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2017-06-13 22:31:53
2511956298
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 165.9
- 红花: 5
- 帖子: 49
- 在线: 18.2小时
- 虫号: 2900966
- 注册: 2013-12-29
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-13 22:59:34
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-13 22:59:34
|
可以试试用加入少量的β-巯基乙醇，打开二硫键，然后在做纯化试试。。。个人想法 （百度搜索之后，发现的内容，借用别人的发给你） 原核细胞表达的包涵体经经反复洗涤后，8mol．L－1尿素溶解（完全变性了），加入复性液（成分：50 mmol．L－1 Tris-HCl,5mmol．L－1 EDTA,1mmol．L－1 氧化型谷光甘肽，5mmol．L－1 还原型谷光甘肽）稀释复性，10℃复性48h。 复性液中加入一定比例的氧化型谷光甘肽和还原型谷光甘肽更有利于蛋白复性。 |
2楼2017-06-13 09:22:29
3楼2017-06-13 09:58:25
5楼2018-08-25 12:44:23
