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shiliyusly新虫 (小有名气)
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拟南芥突变体过表达 已有3人参与
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各位大牛好！ 我目前在做一个基因过表达拟南芥突变体来验证基因功能。 遇到的问题是T2代都没有出现表型，其他物种这个同源基因在拟南芥表型很明显，发表的文章也挺多了。 我构建的重组载体应该没问题，因为转烟草过表达表型是明显的。 T1代抗性苗是用22mg/L hyg培养基筛选，筛选率不是很高；T2代进行了叶片DNA PCR鉴定。 有个疏忽的地方是，我没有对单棵拟南芥进行套袋隔离授粉，只是用绳子把单棵的花绑了下，糟糕的是不同拟南芥还靠的挺近，有时不同棵的花会会碰在一起。 所以想请问，是不是没有套袋这种防止异化授粉的措施，会影响性状分离，所以没出现想要的表型？ 有人有类似的没有套袋，但也能得到表型的经历吗？ 即将毕业，从头来过时间又来不及，好忧伤~~  |
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是自花，不是闭花，你这T1代的阳性苗，一棵就是一个转基因事件，插入位点不同的，不套袋的话，转基因事件之间杂交了，还怎么纯化啊 发自小木虫Android客户端 |
7楼2017-06-05 21:14:13
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异花授粉可能性不大，拟南芥是自花授粉，花开前已经完成授粉。另外，如果没有表型，请分析基因表达量，有时插入位置不合适，是没有表型的～ 发自小木虫IOS客户端 |
10楼2017-07-22 00:00:38
