应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 构建质粒后，通用引物PCR总是得到两条带？
41/1返回列表
查看: 4389  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yu-yumili

新虫 (初入文坛)

[求助] 构建质粒后，通用引物PCR总是得到两条带？

本人是克隆的新手，载体构建好后，师姐建议用载体通用引物进行菌液PCR验证，防止大肠杆菌本身的基因组含有相关基因。我用T7/SP6这一对引物做的菌液PCR，载体长度141bp，目的片段大概500bp，但是，看到跑胶出来的结果，我有点懵，不知道为什么，有目的片段的点都P出了两个条带，而且跑胶位置也是高高低低的，不在同一水平线上，有几个就感觉比目的片段要高一些。求助各位大神，帮小弟我解决一下这些小问题，被困惑好久又想不出原因，跪谢大家了！

构建质粒后，通用引物PCR总是得到两条带？
20170531-剪切.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-06-01 16:11:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大飞哥88

新虫 (初入文坛)
引物特异性问题，特异性不是很强

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-06-02 11:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一颗行走的树

新虫 (初入文坛)
我的也是这样，最下面这一条是引物特异性不好引起的，你送测序了吗？我想知道你的结果，因为我的有条带，但是测不出来

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-06-02 11:27:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西班牙

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一颗行走的树 at 2017-06-02 11:27:08
我的也是这样，最下面这一条是引物特异性不好引起的，你送测序了吗？我想知道你的结果，因为我的有条带，但是测不出来

你们的问题解决了吗

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2019-05-13 16:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yu-yumili 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:17 by pswait
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 0805 316求调剂 +4 大雪深藏 2026-03-18 4/200 2026-03-24 17:34 by dick_runner
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 086003食品工程求调剂 +4 淼淼111 2026-03-24 4/200 2026-03-24 11:53 by 544594351
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:00 by macy2011
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭