24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 7238  |  回复: 52

xuexikuang

超级版主

11楼2017-05-31 09:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

铭记于心2222

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 铭记于心2222 at 2017-05-30 22:48:06
确保酶切效果,去磷酸化效果,连接体系,跑胶可以看看哦,别切碎了  做对照看看哪步出问题了

酶切之后不加基因加t4过夜,可以验证你双酶切彻底不;不加t4,按理说菌不会长的,长了说明质粒没切开。双酶切做时间梯度,时间长了没事就多切会等等

发自小木虫IOS客户端
12楼2017-05-31 15:09:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangxiaoguo

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

第一确保双酶切切开了。可以先逐次单酶切。t

发自小木虫Android客户端
202010
13楼2017-05-31 22:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangxiaoguo

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

t4连接看是否长,如果长的话,说明酶切不完全。

发自小木虫Android客户端
202010
14楼2017-05-31 22:11:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangxiaoguo

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

第二,酶切和连接时间最好长一些。一般双酶切出现假阳性的话,很可能是酶切不是很完全。如果两个酶位点太近的话会有位置效应的。另外,确认一下你检测的引物是唯一的。要不可能会出现扩增的并不是目的片段长度,但实际上确连好了

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

202010
15楼2017-05-31 22:15:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

111sst

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

16楼2017-06-01 13:02:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

司空呆呆

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

你的载体有点小,换一个7000左右的,很好链接的。

发自小木虫Android客户端
17楼2017-06-01 13:41:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大片段不好连接,效率低,但是还是有阳性的。我的问题是重组质粒超过10 kb,很难转化进去,加上重组效率低筛不到目的菌。
18楼2017-06-01 16:05:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我好暴躁啊

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
16楼: Originally posted by 111sst at 2017-06-01 13:02:42
这是什么菌啊

DH5α

发自小木虫Android客户端
19楼2017-06-01 17:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lusandanooo

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

用一部克隆吧,就国产的,好用的不行,我之前片段3.8k载体3k,双酶切折腾了三个月连不上,一步克隆做了一次两天搞定。

发自小木虫Android客户端
毕了业真开心嘻嘻嘻嘻嘻
20楼2017-06-01 20:58:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我好暴躁啊 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +10 GENJIOW 2026-03-31 10/500 2026-04-01 01:30 by 1018329917
[考研] 0856材料与化工调剂,339 +9 10213207 2026-03-31 9/450 2026-04-01 00:49 by fmesaito
[考研] 材料调剂 +3 一样YWY 2026-03-31 3/150 2026-03-31 23:02 by wxiongid
[考博] 26申博 +4 加油冲啊! 2026-03-26 4/200 2026-03-31 22:42 by greychen00
[考研] 求调剂,一志愿北林食品与营养095500,301分,已过六级,有科研经历 +3 快乐储蓄罐 2026-03-31 3/150 2026-03-31 20:20 by plum
[考研] 086000调剂 +5 7901117076 2026-03-26 5/250 2026-03-31 17:45 by 544594351
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 0710生物学求调剂! +5 叙述文 2026-03-31 5/250 2026-03-31 17:32 by 唐沐儿
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +6 Ong3 2026-03-27 6/300 2026-03-31 15:18 by yanflower7133
[考研] 354求调剂 +3 lxb598 2026-03-31 4/200 2026-03-31 13:42 by sophie2180
[考研] 0856调剂 +6 曲听筠 2026-03-30 6/300 2026-03-31 09:44 by Jaylen.
[考研] 332求调剂 +14 032500 2026-03-25 14/700 2026-03-30 20:03 by 无际的草原
[考研] 085601材料工程找调剂 +17 oatmealR 2026-03-29 18/900 2026-03-30 19:21 by Wang200018
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 290求调剂 +3 dfffsar 2026-03-29 3/150 2026-03-29 22:38 by 毛毛毛阿莫2
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
信息提示
请填处理意见