应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体和目的基因连接不上啊，一学期了，求助
555/6返回列表上一页123456下一页
查看: 5877  |  回复: 54
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lingorling

铁虫 (小有名气)
我建议直接先测一下感受态的活性。有的时候一批感受态都不好用，这样的话可以换不同批次的感受态。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
41楼2017-05-27 07:15:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)
拿来，我帮你做！

发自小木虫Android客户端
回复此楼
42楼2017-05-27 07:45:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢大旭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
41楼: Originally posted by lingorling at 2017-05-27 07:15:15
我建议直接先测一下感受态的活性。有的时候一批感受态都不好用，这样的话可以换不同批次的感受态。

活性测过了，活性可以的

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
43楼2017-05-27 09:46:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotianyanan

银虫 (小有名气)
浓度太低，推荐你可以用重组法构载体

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
开心每一天，科研小宇宙
44楼2017-05-28 12:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反对派

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 谢大旭 at 2017-05-24 18:11:14
做连接载体和目的基因加多少ng呢
...

把载体和目的基因寄给我，我帮你做

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
45楼2017-05-28 13:05:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反对派

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我可以帮你很快做出来

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
46楼2017-05-28 13:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

54zhongling

新虫 (初入文坛)
PCR产物直接纯化

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
47楼2017-05-28 14:58:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王查查23

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
48楼2017-05-28 18:28:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

铭记于心2222

铜虫 (初入文坛)
总的体系150-200ng

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
49楼2017-05-29 00:24:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

伤何处

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得首先你得确定载体和目的片段是否连接上。然后再确定是不是转化的问题（如果实验室其他人的转化没问题，你的应该也不会有问题）。
所以，连接完后 你可以取1-2ul的连接产物为模板，用载体上的引物做一轮PCR，看看是否扩增出你的目的片段。
如果有目的条带，说明你的片段已经连上载体了，连接反应没问题。如果感受态没问题，你再确认下抗性之类的有没有问题；
如果没有目的条带，说明没有连上，那你就换其他方法。推荐诺唯赞（Vazyme）的一步法试剂盒，效率高，便宜。
赞一下(3人) 回复此楼
对也罢，错也罢；正也罢，逆也罢；通途也好，崎岖无妨……但问，吾心坚否？若坚，纵使歧路，以铁心，贯穿而过，亦为大道！不坚，便是坦途，也难登临绝顶，观险峰
50楼2017-05-29 00:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 谢大旭 的主题更新
555/6返回列表上一页123456下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +33 医学老男孩 2026-08-13 78/3900 2026-08-17 13:22 by ziyangfang
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7 wangze12014 2026-08-14 8/400 2026-08-17 12:45 by a441914426
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 13/650 2026-08-17 12:33 by gltch
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 4/200 2026-08-17 12:10 by 4GBAYCdVQoK3
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 3/150 2026-08-17 09:49 by xLVPIRuSvCUe
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭