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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lingorling

铁虫 (小有名气)

我建议直接先测一下感受态的活性。有的时候一批感受态都不好用,这样的话可以换不同批次的感受态。

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41楼2017-05-27 07:15:15
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

42楼2017-05-27 07:45:08
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谢大旭

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
41楼: Originally posted by lingorling at 2017-05-27 07:15:15
我建议直接先测一下感受态的活性。有的时候一批感受态都不好用,这样的话可以换不同批次的感受态。

活性测过了,活性可以的

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43楼2017-05-27 09:46:23
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biotianyanan

银虫 (小有名气)

浓度太低,推荐你可以用重组法构载体

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开心每一天,科研小宇宙
44楼2017-05-28 12:54:34
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反对派

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 谢大旭 at 2017-05-24 18:11:14
做连接载体和目的基因加多少ng呢
...

把载体和目的基因寄给我,我帮你做

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45楼2017-05-28 13:05:34
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反对派

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我可以帮你很快做出来

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46楼2017-05-28 13:12:25
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54zhongling

新虫 (初入文坛)

47楼2017-05-28 14:58:15
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王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

48楼2017-05-28 18:28:13
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铭记于心2222

铜虫 (初入文坛)

49楼2017-05-29 00:24:10
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伤何处

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得首先你得确定载体和目的片段是否连接上。然后再确定是不是转化的问题(如果实验室其他人的转化没问题,你的应该也不会有问题)。
所以,连接完后 你可以取1-2ul的连接产物为模板,用载体上的引物做一轮PCR,看看是否扩增出你的目的片段。
如果有目的条带,说明你的片段已经连上载体了,连接反应没问题。如果感受态没问题,你再确认下抗性之类的有没有问题;
如果没有目的条带,说明没有连上,那你就换其他方法。推荐诺唯赞(Vazyme)的一步法试剂盒,效率高,便宜。
对也罢,错也罢;正也罢,逆也罢;通途也好,崎岖无妨……但问,吾心坚否?若坚,纵使歧路,以铁心,贯穿而过,亦为大道!不坚,便是坦途,也难登临绝顶,观险峰
50楼2017-05-29 00:46:11
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