应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。
91/1返回列表
查看: 2218  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小臭臭

新虫 (初入文坛)

[求助] 想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。 已有1人参与

我用的方法是，直接从平板上挑取单菌落加入到5微升H20中，微波炉加热5分钟，之后做PCR，用了几种不同的引物，结果就是都P不出来，实在想不到是什么原因？想请问一下各位都是怎么做的？能P出来吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-05-20 20:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ziyya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌挑的太多，模板量过高？
赞一下 回复此楼
春华不若秋实
2楼2017-05-20 21:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aishida

禁虫 (职业作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-20 22:23:28
本帖内容被屏蔽
3楼2017-05-20 21:56:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123456789z

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-21 22:47:11
挑单菌落在50ul水，煮沸10min 后冰浴2min ，12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-05-21 07:56:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aishida at 2017-05-20 21:56:18
挑单菌落在离心管（不要加水），5分钟高温加热5分钟负二十度反复几次再pcr

可以吗？不加水的话，菌会不会烤干呀？
赞一下 回复此楼
5楼2017-05-21 18:24:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 123456789z at 2017-05-21 07:56:22
挑单菌落在50ul水，煮沸10min 后冰浴2min ，12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR

那PCR体系的跟普通PCR体系有什么不同吗？
赞一下 回复此楼
6楼2017-05-21 18:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ziyya at 2017-05-20 21:44:21
菌挑的太多，模板量过高？

有挑的不多的，很少的也是P不出来。
赞一下 回复此楼
7楼2017-05-21 18:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenmx1257

新虫 (初入文坛)
我们也是永远p不出来，用的takara premix。后来换了家公司就ok了，你可以试试。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-05-24 09:20:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小八BBF

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by chenmx1257 at 2017-05-24 09:20:45
我们也是永远p不出来，用的takara premix。后来换了家公司就ok了，你可以试试。

我用的takara的rTaq也是都P不出来，请问您后来换了什么酶才做出来的呢？
赞一下 回复此楼
9楼2017-07-31 15:53:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小臭臭 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 听说今天filecode变了 +18 布布和一二 2026-08-06 32/1600 2026-08-07 00:37 by ywclong81
[基金申请] 基金中了 +6 laoda193707 2026-08-06 6/300 2026-08-06 23:34 by dragonxp
[基金申请] filecode +10 等待解的谜 2026-08-06 14/700 2026-08-06 21:16 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +3 archvillain 2026-08-06 7/350 2026-08-06 21:05 by archvillain
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:19 by 苏知砚
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭