应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 2084  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小臭臭

新虫 (初入文坛)

[求助] 想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。 已有1人参与

我用的方法是，直接从平板上挑取单菌落加入到5微升H20中，微波炉加热5分钟，之后做PCR，用了几种不同的引物，结果就是都P不出来，实在想不到是什么原因？想请问一下各位都是怎么做的？能P出来吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-05-20 20:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ziyya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌挑的太多，模板量过高？
赞一下 回复此楼
春华不若秋实
2楼2017-05-20 21:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aishida

禁虫 (职业作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-20 22:23:28
本帖内容被屏蔽
3楼2017-05-20 21:56:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123456789z

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-21 22:47:11
挑单菌落在50ul水，煮沸10min 后冰浴2min ，12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-05-21 07:56:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aishida at 2017-05-20 21:56:18
挑单菌落在离心管（不要加水），5分钟高温加热5分钟负二十度反复几次再pcr

可以吗？不加水的话，菌会不会烤干呀？
赞一下 回复此楼
5楼2017-05-21 18:24:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 123456789z at 2017-05-21 07:56:22
挑单菌落在50ul水，煮沸10min 后冰浴2min ，12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR

那PCR体系的跟普通PCR体系有什么不同吗？
赞一下 回复此楼
6楼2017-05-21 18:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ziyya at 2017-05-20 21:44:21
菌挑的太多，模板量过高？

有挑的不多的，很少的也是P不出来。
赞一下 回复此楼
7楼2017-05-21 18:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenmx1257

新虫 (初入文坛)
我们也是永远p不出来，用的takara premix。后来换了家公司就ok了，你可以试试。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-05-24 09:20:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小八BBF

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by chenmx1257 at 2017-05-24 09:20:45
我们也是永远p不出来，用的takara premix。后来换了家公司就ok了，你可以试试。

我用的takara的rTaq也是都P不出来，请问您后来换了什么酶才做出来的呢？
赞一下 回复此楼
9楼2017-07-31 15:53:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小臭臭 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-30 5/250 2026-03-31 09:41 by zhshch
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +5 秋二十二 2026-03-30 5/250 2026-03-31 06:55 by 无际的草原
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 317求调剂 +8 十闲wx 2026-03-24 8/400 2026-03-30 21:00 by peike
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +8 26要上岸 2026-03-28 8/400 2026-03-30 16:39 by herarysara
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-27 6/300 2026-03-30 10:25 by herarysara
[考研] 317求调剂 +10 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 10/500 2026-03-30 09:45 by longlotian
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +5 笃行致远. 2026-03-28 5/250 2026-03-30 06:56 by ilovexiaobin
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 压国家一区线，求导师收留，有恩必谢！ +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315（英一）求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭