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小臭臭

新虫 (初入文坛)

[求助] 想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。已有1人参与

我用的方法是,直接从平板上挑取单菌落加入到5微升H20中,微波炉加热5分钟,之后做PCR,用了几种不同的引物,结果就是都P不出来,实在想不到是什么原因?想请问一下各位都是怎么做的?能P出来吗?
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小八BBF

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by chenmx1257 at 2017-05-24 09:20:45
我们也是永远p不出来,用的takara premix。后来换了家公司就ok了,你可以试试。

我用的takara的rTaq也是都P不出来,请问您后来换了什么酶才做出来的呢?
9楼2017-07-31 15:53:46
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ziyya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌挑的太多,模板量过高?
春华不若秋实
2楼2017-05-20 21:44:21
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aishida

禁虫 (职业作家)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-20 22:23:28
本帖内容被屏蔽

3楼2017-05-20 21:56:18
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123456789z

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-21 22:47:11
挑单菌落在50ul水,煮沸10min 后冰浴2min ,12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-05-21 07:56:22
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