应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。
91/1返回列表
查看: 1993  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小臭臭

新虫 (初入文坛)

[求助] 想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。已有1人参与

我用的方法是，直接从平板上挑取单菌落加入到5微升H20中，微波炉加热5分钟，之后做PCR，用了几种不同的引物，结果就是都P不出来，实在想不到是什么原因？想请问一下各位都是怎么做的？能P出来吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2017-05-20 20:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ziyya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌挑的太多，模板量过高？
赞一下 回复此楼
春华不若秋实
2楼2017-05-20 21:44:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aishida

禁虫 (职业作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-20 22:23:28
本帖内容被屏蔽
3楼2017-05-20 21:56:18
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123456789z

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-21 22:47:11
挑单菌落在50ul水，煮沸10min 后冰浴2min ，12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-05-21 07:56:22
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aishida at 2017-05-20 21:56:18
挑单菌落在离心管（不要加水），5分钟高温加热5分钟负二十度反复几次再pcr

可以吗？不加水的话，菌会不会烤干呀？
赞一下 回复此楼
5楼2017-05-21 18:24:16
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 123456789z at 2017-05-21 07:56:22
挑单菌落在50ul水，煮沸10min 后冰浴2min ，12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR

那PCR体系的跟普通PCR体系有什么不同吗？
赞一下 回复此楼
6楼2017-05-21 18:24:55
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小臭臭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ziyya at 2017-05-20 21:44:21
菌挑的太多，模板量过高？

有挑的不多的，很少的也是P不出来。
赞一下 回复此楼
7楼2017-05-21 18:25:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenmx1257

新虫 (初入文坛)
我们也是永远p不出来，用的takara premix。后来换了家公司就ok了，你可以试试。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-05-24 09:20:45
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小八BBF

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by chenmx1257 at 2017-05-24 09:20:45
我们也是永远p不出来，用的takara premix。后来换了家公司就ok了，你可以试试。

我用的takara的rTaq也是都P不出来，请问您后来换了什么酶才做出来的呢？
赞一下 回复此楼
9楼2017-07-31 15:53:46
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小臭臭 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭