24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3000  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Zhibao1994

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 质粒转化实验 已有2人参与

向各位请教下关于DNA质粒转化实验。我最近在做质粒转化实验,将老师合成的质粒转入农杆菌中。第一步是将细胞从零下八十摄氏度中取出放入冰盒中半个小时,同时预冷两个1.5ml的离心管,待细胞融化后,将细胞分装于两个离心管(离心管已标注转化的质粒名称),各100ul,第二步:加入2ul的质粒,在冰上30分钟。热击(42度,45秒),然后冰上放2分钟。第三步:加入SOC 0.9ml,然后在37度中培养一个小时,离心10分钟,4000转每分钟。涂板(Kan,LB),37度培养隔夜观察。老是只能看到几个菌落。

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Zhibao1994

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
7楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2017-05-10 16:20:09
你确定是使用农杆菌感受态来做的吗,按照你的描述应该是DH5α的操作步骤。如果确定是农杆菌转化,步骤是不正确的,而且农杆菌的生长需要2-3天,过夜没有很正常。
农杆菌转化步骤:
1、 加1ug DNA于200ul感受态细胞 ...

谢谢。

发自小木虫Android客户端
8楼2017-05-10 18:21:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

stone2239

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-10 07:54:43
换感受态试试,另外长的几个菌落是不是阳性菌落呢?如果是倒也不必纠结
2楼2017-05-09 15:10:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风霜非暖

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

3楼2017-05-09 23:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Zhibao1994

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2017-05-09 15:10:52
换感受态试试,另外长的几个菌落是不是阳性菌落呢?如果是倒也不必纠结

pMK_ppvtmv质粒转到Dh5a细胞有,但前天做的几个质粒却没有

发自小木虫Android客户端
4楼2017-05-10 06:27:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +5 月照花林。 2026-04-01 5/250 2026-04-01 11:39 by ms629
[考研] 302求调剂一志愿北航070300,本科郑大化学 +7 圣日耳曼条 2026-04-01 8/400 2026-04-01 11:13 by chemdavid
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
[考研] 342求调剂 +9 Mary Keen 2026-03-28 9/450 2026-04-01 09:50 by 我的船我的海
[考博] 26申博 +4 加油冲啊! 2026-03-26 4/200 2026-03-31 22:42 by greychen00
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +3 wwwwffffff 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:49 by 曾曾曾!
[考研] 085601英二数二求调剂 总分325 +4 余航航 2026-03-31 4/200 2026-03-31 17:38 by 唐沐儿
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +10 XX小邓 2026-03-29 10/500 2026-03-31 16:46 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工272求调剂 +25 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 25/1250 2026-03-31 16:27 by hypershenger
[考研] 求调剂 +8 11ggg 2026-03-30 8/400 2026-03-31 13:56 by nanaliuyun
[考研] 求调剂 +4 图鉴212 2026-03-30 4/200 2026-03-31 10:20 by cal0306
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +6 lmnlzy 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 291求调剂 +12 Y-cap 2026-03-29 15/750 2026-03-31 09:25 by Huaxue_Wang
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-27 9/450 2026-03-30 20:10 by 无际的草原
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
信息提示
请填处理意见