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Zhibao1994新虫 (小有名气)
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[求助]
质粒转化实验 已有2人参与
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向各位请教下关于DNA质粒转化实验。我最近在做质粒转化实验，将老师合成的质粒转入农杆菌中。第一步是将细胞从零下八十摄氏度中取出放入冰盒中半个小时，同时预冷两个1.5ml的离心管，待细胞融化后，将细胞分装于两个离心管（离心管已标注转化的质粒名称），各100ul,第二步：加入2ul的质粒，在冰上30分钟。热击（42度，45秒)，然后冰上放2分钟。第三步：加入SOC 0.9ml，然后在37度中培养一个小时，离心10分钟，4000转每分钟。涂板（Kan，LB），37度培养隔夜观察。老是只能看到几个菌落。 @biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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3楼2017-05-09 23:02:20
2楼2017-05-09 15:10:52
Zhibao1994
新虫 (小有名气)
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- 注册: 2017-03-25
- 专业: 植物病理学
4楼2017-05-10 06:27:37
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-10 07:55:08
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-10 07:55:08
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转化弄杆菌:冰置30分钟，37度1分钟液氮2分钟重复一次，冰置5分钟，加不含抗生素LB，30度摇3个小时，涂板，30度倒置培养过夜。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-05-10 07:53:08