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质粒转化实验 已有2人参与
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向各位请教下关于DNA质粒转化实验。我最近在做质粒转化实验，将老师合成的质粒转入农杆菌中。第一步是将细胞从零下八十摄氏度中取出放入冰盒中半个小时，同时预冷两个1.5ml的离心管，待细胞融化后，将细胞分装于两个离心管（离心管已标注转化的质粒名称），各100ul,第二步：加入2ul的质粒，在冰上30分钟。热击（42度，45秒)，然后冰上放2分钟。第三步：加入SOC 0.9ml，然后在37度中培养一个小时，离心10分钟，4000转每分钟。涂板（Kan，LB），37度培养隔夜观察。老是只能看到几个菌落。 @biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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转化弄杆菌:冰置30分钟，37度1分钟液氮2分钟重复一次，冰置5分钟，加不含抗生素LB，30度摇3个小时，涂板，30度倒置培养过夜。 发自小木虫Android客户端 |
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