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修香恋

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR使用同一引物扩增基因组有条带,cDNA无条带 已有3人参与

因为需要做实时荧光定量PCR,所以先做普通PCR扩增cDNA,但是没有条带,降过温度也用过两步法,均无条带。但用这对引物扩增基因组DNA时,却能扩增出条带,这说明引物应该没问题啊,但是为什么cDNA无法扩增条带呢,求大神指点,万分感激!
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修香恋

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by wenting9999 at 2017-04-21 09:01:51
PCR扩增;无怪乎模板、引物、反应条件(试剂、时间、温度)
从你不完整的叙述中可以判断的是cDNA 能扩增内参,说明cDNA没有问题;gDNA和cDNA使用同一种引物gDNA可以扩增,但cDNA
无扩增,不知道你的引物是怎样设计 ...

引物是根据cDNA序列设计的,不是根据基因组DNA设计的,这样也有可能设在内含子上吗?求解答啊,谢谢!
9楼2017-04-21 11:07:37
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修香恋

铜虫 (小有名气)

想补充一下,cDNA用内参基因扩过,也用于扩过其他基因,都可以扩增出条带,求解释啊求解释!
2楼2017-04-20 17:13:44
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

做一个阳光、开朗的小和尚
3楼2017-04-20 23:24:12
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fendouzi

禁虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-21 07:45:29
本帖内容被屏蔽

4楼2017-04-20 23:53:53
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