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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » PCR使用同一引物扩增基因组有条带，cDNA无条带
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修香恋

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR使用同一引物扩增基因组有条带，cDNA无条带 已有3人参与

因为需要做实时荧光定量PCR，所以先做普通PCR扩增cDNA,但是没有条带，降过温度也用过两步法，均无条带。但用这对引物扩增基因组DNA时，却能扩增出条带，这说明引物应该没问题啊，但是为什么cDNA无法扩增条带呢，求大神指点，万分感激！
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1楼 2017-04-20 17:08:54
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修香恋

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wenting9999 at 2017-04-21 09:01:51
PCR扩增；无怪乎模板、引物、反应条件（试剂、时间、温度）
从你不完整的叙述中可以判断的是cDNA 能扩增内参，说明cDNA没有问题；gDNA和cDNA使用同一种引物gDNA可以扩增，但cDNA
无扩增，不知道你的引物是怎样设计 ...

引物是根据cDNA序列设计的，不是根据基因组DNA设计的，这样也有可能设在内含子上吗？求解答啊，谢谢！
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9楼2017-04-21 11:07:37
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修香恋

铜虫 (小有名气)
想补充一下，cDNA用内参基因扩过，也用于扩过其他基因，都可以扩增出条带，求解释啊求解释!
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2楼2017-04-20 17:13:44
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
引物设计有问题？

发自小木虫Android客户端
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做一个阳光、开朗的小和尚
3楼2017-04-20 23:24:12
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fendouzi

禁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-21 07:45:29
本帖内容被屏蔽
4楼2017-04-20 23:53:53
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