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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)

[交流] 做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟,求问原因!!!!!!已有5人参与

做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟,求问原因!!!!!!

做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟,求问原因!!!!!!
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预估预估

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这图真乱,跑了多少样品?

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4楼2017-05-08 13:33:53
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许彦

木虫 (正式写手)

2楼2017-04-23 15:28:22
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2017-04-23 15:28:22
扩增曲线呢?

溶解曲线也不怎么样。。。。。。
做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟,求问原因!!!!!!-1
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3楼2017-05-08 10:24:20
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hx814102

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-10 07:56:25
我的妈呀、你要用排除法(1)确保引物特异、(2)确保模板质量(3)确保操作仔细,正确!这样就不会有问题!

发自小木虫IOS客户端
Everydayisanewday!
5楼2017-05-08 22:55:25
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hx814102 at 2017-05-08 22:55:25
我的妈呀、你要用排除法(1)确保引物特异、(2)确保模板质量(3)确保操作仔细,正确!这样就不会有问题!

排除法说着容易,做起来难。。。操作应该没问题,引物也是实验室共用的,别人用还可以。自己提的RNA或许有问题吧。想问你是怎么提取组织RNA的?
6楼2017-05-09 17:24:16
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 预估预估 at 2017-05-08 13:33:53
这图真乱,跑了多少样品?

样品只有4个,但同时测了好几个基因
7楼2017-05-09 17:25:12
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stabilized

银虫 (小有名气)

扩增曲线呢
坚持!
8楼2017-05-09 17:28:42
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hx814102

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-10 07:56:56
引用回帖:
6楼: Originally posted by w1t2fg1 at 2017-05-09 17:24:16
排除法说着容易,做起来难。。。操作应该没问题,引物也是实验室共用的,别人用还可以。自己提的RNA或许有问题吧。想问你是怎么提取组织RNA的?...

买的高纯总RNA提取试剂盒、严格按要求在超净台里提取,提完以后跑胶测浓度、确定Rna质量很好以后再反转录!

发自小木虫IOS客户端
Everydayisanewday!
9楼2017-05-09 23:02:17
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hx814102 at 2017-05-09 23:02:17
买的高纯总RNA提取试剂盒、严格按要求在超净台里提取,提完以后跑胶测浓度、确定Rna质量很好以后再反转录!
...

好吧。我用的Trizol,看别人都是液氮研磨,而我这边是用组织研磨器,就是放珠子来回震荡的。不知道这种对抽RNA有没有影响。
10楼2017-05-10 10:33:40
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