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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟，求问原因！！！！！！
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)

[交流] 做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟，求问原因！！！！！！ 已有5人参与

做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟，求问原因！！！！！！

做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟，求问原因！！！！！！
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1楼 2017-04-19 13:35:44
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预估预估

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这图真乱，跑了多少样品？

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我就是我，我就是人间不一样的烟火。
4楼2017-05-08 13:33:53
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普通回帖

许彦

木虫 (正式写手)
扩增曲线呢？

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2楼2017-04-23 15:28:22
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2017-04-23 15:28:22
扩增曲线呢？

溶解曲线也不怎么样。。。。。。
做的Real Time-PCR,溶解曲线乱七八糟，求问原因！！！！！！-1
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3楼2017-05-08 10:24:20
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hx814102

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-10 07:56:25
我的妈呀、你要用排除法（1）确保引物特异、（2）确保模板质量（3）确保操作仔细，正确！这样就不会有问题！

发自小木虫IOS客户端
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Everydayisanewday!
5楼2017-05-08 22:55:25
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hx814102 at 2017-05-08 22:55:25
我的妈呀、你要用排除法（1）确保引物特异、（2）确保模板质量（3）确保操作仔细，正确！这样就不会有问题！

排除法说着容易，做起来难。。。操作应该没问题，引物也是实验室共用的，别人用还可以。自己提的RNA或许有问题吧。想问你是怎么提取组织RNA的？
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6楼2017-05-09 17:24:16
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 预估预估 at 2017-05-08 13:33:53
这图真乱，跑了多少样品？

样品只有4个，但同时测了好几个基因
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7楼2017-05-09 17:25:12
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stabilized

银虫 (小有名气)
扩增曲线呢
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坚持！
8楼2017-05-09 17:28:42
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hx814102

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-10 07:56:56
引用回帖:
6楼: Originally posted by w1t2fg1 at 2017-05-09 17:24:16
排除法说着容易，做起来难。。。操作应该没问题，引物也是实验室共用的，别人用还可以。自己提的RNA或许有问题吧。想问你是怎么提取组织RNA的？...

买的高纯总RNA提取试剂盒、严格按要求在超净台里提取，提完以后跑胶测浓度、确定Rna质量很好以后再反转录！

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Everydayisanewday!
9楼2017-05-09 23:02:17
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w1t2fg1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hx814102 at 2017-05-09 23:02:17
买的高纯总RNA提取试剂盒、严格按要求在超净台里提取，提完以后跑胶测浓度、确定Rna质量很好以后再反转录！
...

好吧。我用的Trizol,看别人都是液氮研磨，而我这边是用组织研磨器，就是放珠子来回震荡的。不知道这种对抽RNA有没有影响。
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10楼2017-05-10 10:33:40
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