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扶桑若木

新虫 (正式写手)

[求助] 酶切过后跑胶,总是出现比较多杂带,找不出原因。 已有1人参与

按老师要求酶切过夜,但8F8R引物那一组,老是出现杂带(之前PCR,探索最适温度,应该没出什么问题,后来又验证了一次温度应该是确定了)

而且按说DNA提取以及PC2过程也没什么问题
酶切时间过夜长也应该不会,切除其他条带来,因为具有引物具有特异性(而且条带也就几百kb,不算太长)

酶切过后跑胶,总是出现比较多杂带,找不出原因。


酶切过后跑胶,总是出现比较多杂带,找不出原因。-1


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enjoy大志

铜虫 (小有名气)

酶切的时间过长,建议3h试试

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

付出定有回报
8楼2017-04-20 15:57:25
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

2楼2017-04-18 23:35:24
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

是因为污染吗?但也不像呀!

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3楼2017-04-18 23:35:45
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

4楼2017-04-19 08:09:25
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

不要沉呀啊,请各位大神求助一下。

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5楼2017-04-19 08:09:50
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

。。。。。。。。

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6楼2017-04-19 08:32:11
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

简单说一下实验内容吧。没头没尾的,很难理解

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

做一个阳光、开朗的小和尚
7楼2017-04-20 00:35:42
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by enjoy大志 at 2017-04-20 15:57:25
酶切的时间过长,建议3h试试

额,能确定是酶切时间过长导致?
跟老师讨论过

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9楼2017-04-20 16:14:28
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2017-04-20 00:35:42
简单说一下实验内容吧。没头没尾的,很难理解

其实就是在提取完DNA产物之后。
用三组不同的引物进行PC r扩增,然后酶切过夜进行分型,(在此之前,试着摸索了PCR的最适退火温度),
其中一组引物酶切过后的结果咋在就是这样比较多,而且于目标带分不清楚。

求大神赐教

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10楼2017-04-20 16:17:41
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