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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 酶切过后跑胶，总是出现比较多杂带，找不出原因。
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扶桑若木

新虫 (正式写手)

[求助] 酶切过后跑胶，总是出现比较多杂带，找不出原因。 已有1人参与

按老师要求酶切过夜，但8F8R引物那一组，老是出现杂带（之前PCR，探索最适温度，应该没出什么问题，后来又验证了一次温度应该是确定了）

而且按说DNA提取以及PC2过程也没什么问题
酶切时间过夜长也应该不会，切除其他条带来，因为具有引物具有特异性（而且条带也就几百kb，不算太长）

酶切过后跑胶，总是出现比较多杂带，找不出原因。


酶切过后跑胶，总是出现比较多杂带，找不出原因。-1


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1楼 2017-04-18 23:34:19
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enjoy大志

铜虫 (小有名气)
酶切的时间过长，建议3h试试

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扶桑若木
付出定有回报
8楼2017-04-20 15:57:25
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普通回帖

扶桑若木

新虫 (正式写手)
请各路大神帮忙分析一下。

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2楼2017-04-18 23:35:24
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扶桑若木

新虫 (正式写手)
是因为污染吗？但也不像呀！

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3楼2017-04-18 23:35:45
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扶桑若木

新虫 (正式写手)
。。。。

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4楼2017-04-19 08:09:25
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扶桑若木

新虫 (正式写手)
不要沉呀啊，请各位大神求助一下。

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5楼2017-04-19 08:09:50
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扶桑若木

新虫 (正式写手)
。。。。。。。。

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6楼2017-04-19 08:32:11
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
简单说一下实验内容吧。没头没尾的，很难理解

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

扶桑若木
做一个阳光、开朗的小和尚
7楼2017-04-20 00:35:42
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扶桑若木

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by enjoy大志 at 2017-04-20 15:57:25
酶切的时间过长，建议3h试试

额，能确定是酶切时间过长导致？
跟老师讨论过

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9楼2017-04-20 16:14:28
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扶桑若木

新虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2017-04-20 00:35:42
简单说一下实验内容吧。没头没尾的，很难理解

其实就是在提取完DNA产物之后。
用三组不同的引物进行PC r扩增，然后酶切过夜进行分型，（在此之前，试着摸索了PCR的最适退火温度），
其中一组引物酶切过后的结果咋在就是这样比较多，而且于目标带分不清楚。

求大神赐教

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10楼2017-04-20 16:17:41
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