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wbye

新虫 (小有名气)

[求助] 高效液相分析问题求助 已有5人参与

各位专家老师,各位师兄师姐,求问这两个物质要怎么分离,有什么好方法没,这两个是标准品分别跑出来的图,现在想探寻一个方法把他们分开,改了好几次保留时间还是没什么明显变化,一个是没食子酸,一个是原儿茶酸

高效液相分析问题求助
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高效液相分析问题求助-1
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wbye: 金币+1, 有帮助, 感谢回答 2017-04-21 19:37:01
一个是没食子酸,一个是原儿茶酸,这些物质在HPLC分析中常常需要调整流动相pH值,例如:使用0.3%磷酸-乙腈系统(大约90--10)检测波长254nm
10楼2017-04-12 11:51:51
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wbye

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by wbye at 2017-04-11 22:58:47
这是用了25cm的新柱子加百分0.1酸后跑出来的图,都会出现这样的凸起
...

新柱子是赛铂思,C18   25cm

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9楼2017-04-11 23:04:06
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wbye

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by llw1986 at 2017-04-12 17:18:43
感觉你这个柱子对这俩个化合物完全没有保留啊 都在死体积内就出峰了,换根极性柱试试

没有柱子,早上加了酸后,终于能够完美把他们分离了,但是一改成剃度洗脱别的物质基线就飘了,没有加酸改剃度基线还好,没有很大的波动,一加酸改剃度就惨不忍睹了,但是没加酸没食子酸和原儿茶酸有分不开,这怎么办

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15楼2017-04-12 18:15:24
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
19楼: Originally posted by wbye at 2017-04-12 02:33:46
其实我是为了好几种物质的,不是为了分离这两种,需要剃度洗脱,今天加酸后虽然是能够分开,但是一改剃度基线就飘了,不如不加酸,不加酸这没食子酸和原儿茶酸又分不开,加酸基线又飘了,我进了一针甲醇还飘了,没 ...

你用的是什么波长?

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20楼2017-04-12 21:45:49
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用的啥柱子,流动相pH多少?如果是250 mm的长柱,建议换柱子,因为根本就没保留,所以也没法分离
2楼2017-04-11 15:17:12
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

应该介绍分析条件,才能确定为啥没有挂住。
3楼2017-04-11 18:02:38
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wbye

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2017-04-11 15:17:12
用的啥柱子,流动相pH多少?如果是250 mm的长柱,建议换柱子,因为根本就没保留,所以也没法分离

wondasil   C18    15cm的,本来有加百分0.1的甲酸的,然后基线飘得厉害,两个大凸起,然后就没加酸了,这是直接甲醇和水跑的,那条是蓝色B浓度线,百分之五的,没想到这就出来了,换了方法浓度后,还是没什么变化,这两个酸就是分不开,请教有什么办法吗?

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4楼2017-04-11 22:45:11
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wbye

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2017-04-11 18:02:38
应该介绍分析条件,才能确定为啥没有挂住。

图上是百分五的B浓度(甲醇)等度的,然后换了百分十的浓度等度,百分二十等度,从五到三十五斜率低和斜率高,从二十到五斜率高和斜率低都没用,还是没什么变化,我真的不知怎办了,要不换根25cm  C18的柱子(新买的)跑一下看看,还有我要不要加酸呢?因为前面试了好多次,基线都会出现两个凸起(15cm的老柱子和25cm的新柱子都会),然后不加酸反而比较平了,跑的我怀疑人生了

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5楼2017-04-11 22:54:37
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wbye

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2017-04-11 15:17:12
用的啥柱子,流动相pH多少?如果是250 mm的长柱,建议换柱子,因为根本就没保留,所以也没法分离

还有柱子是用了好久了的

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6楼2017-04-11 22:55:59
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wbye

新虫 (小有名气)

7楼2017-04-11 22:57:32
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wbye

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wbye at 2017-04-11 22:57:32

这是用了25cm的新柱子加百分0.1酸后跑出来的图,都会出现这样的凸起

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8楼2017-04-11 22:58:47
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