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花之韵615

新虫 (初入文坛)

[求助] 293t细胞的转染和免疫荧光 已有3人参与

有用过lipo3000转染的吗,我做转染老是做不好,转染效率好低,293t细胞贴壁不牢,求提高转染效率的方法,293t的免疫荧光步骤

@hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端
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花花贝

金虫 (知名作家)

2楼2017-04-04 17:59:10
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绝对零度的笑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
花之韵615(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2017-04-28 16:12:54
弄一批新的293T,293T的状态好的话随便转都能转得不错。主要是细胞的状态决定转染效率

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2017-04-05 05:57:29
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花之韵615

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 花花贝 at 2017-04-04 17:59:10
293T很好转染的 不加血清试试

铺板后种细胞要血清培养的,是不是转染前几个小时换无血清培养基

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4楼2017-04-05 11:03:50
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花之韵615

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 绝对零度的笑 at 2017-04-05 05:57:29
弄一批新的293T,293T的状态好的话随便转都能转得不错。主要是细胞的状态决定转染效率

我试试

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5楼2017-04-05 11:04:50
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小苦孩纸

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2017-04-28 16:13:11
Lipo3000有一定毒性,转染时间不要过长,如果细胞都飘起来了,可能是毒性引起的,转染的话不去掉血清也可以,另外也和转染质粒性质有关,有的质粒不太好表达。但是一般293还是很好转染成功的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2017-04-05 16:08:54
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意孤城_

金虫 (正式写手)

无血清培养基转,6小时后换液

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7楼2017-04-05 18:51:41
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花之韵615

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小苦孩纸 at 2017-04-05 16:08:54
Lipo3000有一定毒性,转染时间不要过长,如果细胞都飘起来了,可能是毒性引起的,转染的话不去掉血清也可以,另外也和转染质粒性质有关,有的质粒不太好表达。但是一般293还是很好转染成功的

谢谢!

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8楼2017-04-05 23:37:57
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花之韵615

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 意孤城_ at 2017-04-05 18:51:41
无血清培养基转,6小时后换液

好的

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9楼2017-04-05 23:38:37
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科研用户

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

10楼2017-04-11 13:43:16
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