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15978432804

新虫 (小有名气)

[求助] 如何合理的设计引物 已有1人参与

我刚开始做实验就遇到了很头疼的事,我做的是同源克隆,现在要扩一个基因的CDS区的全长,但是在设计引物时走不下去了。那个CDS区有2000bp左右,设计出来的引物得分都很低(我用的是oligo7),整体上引物不是太好,我就先试试看能不能扩出来,但试了好长时间都没结果,TM梯度都试了,原料都没问题,换个别的基因引物就有结果,在相关时间内也表达。也不知道该怎么办了,我设计引物的技术不行,一样能帮帮我,给予指点!!

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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伊巴代提

新虫 (初入文坛)

可以试一下降落式PCR或者延长一下最后一步骤中72℃。

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12楼2017-03-31 07:43:19
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