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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr引物及产物跑胶
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13655698379

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr引物及产物跑胶 已有3人参与

如果PCR上游引物和下游引物退火温度相差10度，是不是就P不出来？为何PCR条件相同，产物跑小孔胶条带清晰，跑大孔胶就弥散了（准备跑大孔胶做胶回收）？

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-03-22 20:17:29
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绝对零度的笑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-23 07:45:10
引物Tm值相差比较大推荐用Touch-down PCR，从高Tm值的引物开始第一个循环的退火，然后每个循环降低退火温度。
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2楼2017-03-23 03:49:05
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
差10度也不是p不出来，不过得优化以下条件
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···
3楼2017-03-23 08:59:17
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13655698379

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 绝对零度的笑 at 2017-03-23 03:49:05
引物Tm值相差比较大推荐用Touch-down PCR，从高Tm值的引物开始第一个循环的退火，然后每个循环降低退火温度。

谢谢！这个没试过，之前拉过梯度没P出来

发自小木虫Android客户端
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4楼2017-03-23 09:56:38
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xiaoxi520

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你们做免疫的   我们公司有预制胶片。不知道能不能用到，
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5楼2017-03-23 14:53:51
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elabscience

新虫 (小有名气)
顶一个
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专注科学研究
6楼2017-03-23 15:04:26
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