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问下大家现在还用不用蓝白筛选了? 已有11人参与
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现在载体克隆的技术是越来越成熟了。最初大家喜欢用蓝白筛来进行鉴定假阳性,但最近的话就很少见实验室用这个方法了。我觉得其中原因有:1.即使是白斑假阳性也很高;2.xgal和iptg成本较高;3菌落PCR比蓝白筛选更方便 而且自从引进了同源重组连接技术后,我们实验室的人在做原核克隆表达时甚至都直接跳过了T载体克隆,直接连于表达载体进行测序、保存等步骤。 我想问下大家的实验室现在的蓝白筛选是不是也不常用了??你们觉得原因有哪些? 谢谢 |
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gyesang
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5楼2017-03-14 23:29:18
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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直接菌落pcr就是不涂xgal和iptg来筛选然后菌落pcr,是吗?这样的话假阳性也非常高啊,还有能给我讲讲那种新技术吗?最近在做克隆,不太顺利。![]() 发自小木虫Android客户端 |
6楼2017-03-14 23:42:02
小冀-
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