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新虫 (初入文坛)

[交流] 问下大家现在还用不用蓝白筛选了? 已有11人参与

现在载体克隆的技术是越来越成熟了。最初大家喜欢用蓝白筛来进行鉴定假阳性,但最近的话就很少见实验室用这个方法了。我觉得其中原因有:1.即使是白斑假阳性也很高;2.xgal和iptg成本较高;3菌落PCR比蓝白筛选更方便
而且自从引进了同源重组连接技术后,我们实验室的人在做原核克隆表达时甚至都直接跳过了T载体克隆,直接连于表达载体进行测序、保存等步骤。
我想问下大家的实验室现在的蓝白筛选是不是也不常用了??你们觉得原因有哪些?

谢谢
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无知的小强

木虫 (正式写手)


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全式金的那个载体很好用,假阳性少

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Behind the mask is an idea, and ideas are bulletproof.
9楼2017-03-15 11:53:42
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蓝白斑筛选属于中间步骤,浪费时间

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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2017-03-14 12:38:52
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陪你砸流星

新虫 (初入文坛)


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直接菌落pcr,电泳检测就行了

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3楼2017-03-14 14:19:17
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绝对零度的笑

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
觉得麻烦,现在PCR酶也便宜,随便买管便宜的Taq酶做菌落PCR也挺快
5楼2017-03-14 23:29:18
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