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酶切重组质粒后电泳条带是糊的 已有3人参与
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puc19重组质粒酶切后为什么长这样，应该是两条带的呀。 用BAMHI切的  pUC19重组质粒酶切.JPG |
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2楼2017-03-10 13:22:50
3楼2017-03-11 13:13:54
4楼2017-03-11 14:51:36
原海亮
木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-13 07:43:28
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如果单纯是酶切验证的话，质粒浓度没必要这么高，会有酶切不完全现象。不知道你的目的条带大小是多少，你确定这个重组载体已经构建成功了么？上面是否连有你的目的基因呢？如果你酶切的目的就是验证，那有可能是构建失败了。另外电泳图参数可以调整一下，尽量拿到漂亮的结果。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-03-11 22:19:34
ULYSSEESWB
铁杆木虫 (正式写手)
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6楼2017-03-12 21:20:15
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-13 07:43:55
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-13 07:43:55
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首先，质粒和酶切产物一起跑个胶，对比一下。至于bamhi酶切形成该条带，这有可能是酶切时间不够，我平时都是酶切3-8h。若，仅仅用用于检测，2h就可以。 发自小木虫IOS客户端 |
7楼2017-03-13 01:00:25
8楼2017-03-13 15:00:49