应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切重组质粒后电泳条带是糊的
81/1返回列表
查看: 2869  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

爱折腾的YJ

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切重组质粒后电泳条带是糊的 已有3人参与

puc19重组质粒酶切后为什么长这样，应该是两条带的呀。
用BAMHI切的

酶切重组质粒后电泳条带是糊的
pUC19重组质粒酶切.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-03-10 12:41:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉是胶跑得不好，你再跑一次。然后还有问题就看是不是酶切不完全

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2017-03-10 13:22:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱折腾的YJ

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by drwhoknowss at 2017-03-10 13:22:50
感觉是胶跑得不好，你再跑一次。然后还有问题就看是不是酶切不完全

这是切过头了吧 照理说只有两条带而已
赞一下 回复此楼
3楼2017-03-11 13:13:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱折腾的YJ at 2017-03-11 13:13:54
这是切过头了吧 照理说只有两条带而已...

你的质粒多大？ladder label一下。bamh1切完应该多大？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2017-03-11 14:51:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-13 07:43:28
如果单纯是酶切验证的话，质粒浓度没必要这么高，会有酶切不完全现象。不知道你的目的条带大小是多少，你确定这个重组载体已经构建成功了么？上面是否连有你的目的基因呢？如果你酶切的目的就是验证，那有可能是构建失败了。另外电泳图参数可以调整一下，尽量拿到漂亮的结果。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
天空才是极限，我有信心飞的更高！
5楼2017-03-11 22:19:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ULYSSEESWB

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑个未酶切质粒，可能是质粒提的不好
赞一下 回复此楼
6楼2017-03-12 21:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

enjoy大志

铜虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-13 07:43:55
首先，质粒和酶切产物一起跑个胶，对比一下。至于bamhi酶切形成该条带，这有可能是酶切时间不够，我平时都是酶切3-8h。若，仅仅用用于检测，2h就可以。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
付出定有回报
7楼2017-03-13 01:00:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱折腾的YJ

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 原海亮 at 2017-03-11 22:19:34
如果单纯是酶切验证的话，质粒浓度没必要这么高，会有酶切不完全现象。不知道你的目的条带大小是多少，你确定这个重组载体已经构建成功了么？上面是否连有你的目的基因呢？如果你酶切的目的就是验证，那有可能是构建 ...

是构建成功的，我将2000-6000的基因组插进puc19，现在打算把它切下来插入pet28a表达。之前验证有插上去，现在想回收这个目的基因却没有了。
赞一下 回复此楼
8楼2017-03-13 15:00:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 爱折腾的YJ 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 8/400 2026-03-01 09:26 by 好好好1233
[考研] 272求调剂 +4 材紫有化 2026-02-28 4/200 2026-03-01 09:20 by L135790
[考研] 291分工科求调剂 +5 science饿饿 2026-03-01 5/250 2026-03-01 09:19 by L135790
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 材料类求调剂 +7 wana_kiko 2026-02-28 7/350 2026-03-01 07:55 by ms629
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +5 Soliloquy_Q 2026-02-28 8/400 2026-02-28 23:36 by xyx2012xyx
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[基金申请] 面上可以超过30页吧？ +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭