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加酶切位点后扩增不出来了，在线求助
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| 原来扩的很容易，加了酶切位点和保护碱基后就再也扩不出来了，各种方法都试过了，退火温度，体系改变，做touchdown也试过，就是扩不出来，快急死了，求助各位给点ideal！ |
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匿名
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8楼2017-03-08 09:35:22
原海亮
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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你的模板是什么呢，基因组还是质粒？加了酶切位点后，是什么都扩增不出来，还是扩增出来但特异性不好？实在不行用比较笨的方法，你可以用不加酶切位点的引物扩增，然后连接T载体，然后提质粒，再用加酶切位点的引物来扩增。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-03-08 19:13:51
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6楼2017-03-08 00:24:02
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